牛傳染性胸膜肺炎PCR試劑盒返回列表頁

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更新時間：2020-07-29 15:50:15瀏覽次數(shù)：478次

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PCR試劑盒: PCR-染料法 PCR-探針法

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產品簡介

供貨周期	一周	規(guī)格	50T
貨號	XY-0219	應用領域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產業(yè),農林牧漁
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴增效率,、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性,。

牛傳染性胸膜肺炎PCR試劑盒是群中等小的雙股 DNA 病毒,，根據(jù)其理化性質分 α、β,、γ,、未分類皰疹病毒四個亞科。皰疹病毒感染的宿主范圍廣泛,，可感染人類和其他脊椎動物,。在自然界廣泛存在，主要侵犯外胚層發(fā)育而成的組織,，例如：皮膚,、粘膜和神經組織。

詳情介紹

牛傳染性胸膜肺炎PCR試劑盒

Contagious Bovine Pleuropneumonia (CBPP)

產品及特點

牛傳染性胸膜肺炎（又稱牛肺疫）是由絲狀支原體絲狀亞種引起的一種高度接觸性傳染病,，以滲出性纖維素性肺炎和漿液纖維素性胸膜肺炎為特征,。本病易感動物主要是牦牛、奶牛,、黃牛,、水牛、犏牛,、馴鹿及羚羊,。各種牛對本病的易感性，依其品種,、生活方式及個體抵抗力不同而有區(qū)別,，發(fā)病率為 60%-70%，病死率約 30%-50%,，山羊,、綿羊及駱駝在自然情況下不易感染，其他動物及人無易感性,。主要傳染源是病牛及帶菌牛,。據(jù)報道,，病牛康復 15 個月甚至 2-3 年后還能感染健牛,。本產品是根據(jù) PCR 原理開發(fā)檢測牛傳染性胸膜肺炎的試劑盒,，它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板,。

2. 引物經過精心優(yōu)化,，專一性強，只擴增牛傳染性胸膜肺炎,，但跟其他微生物無交叉反應,。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品,。

4. PCR mix 中含上樣染料,，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,，但只能用于科研,。

牛傳染性胸膜肺炎PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號	成分	規(guī)格
試劑一	PCR MagicMix 3.0	1 mL（紅蓋）
試劑二	超純水	1 mL（亮黃蓋）
試劑三	牛傳染性胸膜肺炎 PCR 引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑四	牛傳染性胸膜肺炎 PCR 陽性對照（1×10E8 拷貝/μL）	50 μL（黃蓋））
試劑五	天凈沙核酸釋放劑（試用裝）	20 次（1 mL，綠蓋）
試劑六	使用手冊	1 份

運輸及保存 低溫運輸,，-20℃保存,，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,，不要污染其他試劑,。

自備試劑樣品 DNA。

使用方法 一,、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA,，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。

2. 如果有 N 個樣品,，則需要做 N+2 個提取,，包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL 芽孢桿菌通用 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋液而得,，樣品制備陰性對照是直接用水,。提取結束后后得到模板 DNA 放冰上待用。

二,、設置 PCR 反應（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性對照,，故需要設置 N+4 個反應,。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分：

成分	樣品管 N+2 個	PCR 陰性對照管	PCR 陽性對照
PCR Magic Mix 3.0	各20 μL	20 μL	20 μLL
牛傳染性胸膜肺炎PCR引物混合液	各2 μL	2 μL	2 μL
N+2 個樣品 DNA 模板	各 18 μL
PCR 陰性對照（超純水）		18 μL
PCR 陽性對照（牛傳染性胸膜肺炎 PCR 陽性對照的 10 倍稀釋液）			18 μL

4. 按下表設置 PCR 反應：

過程	溫度	時間
預變性	95℃	5 min
PCR反應（35個循環(huán)）	95℃	30 sec
	55℃	30 sec
	72℃	15 sec
后延伸	72℃	10 min

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產物,。電泳檢測 PCR 產物,。本產品提供的 PCR Mix 在擴增結束后可以直接上樣,，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),，陰性對照必須無任何擴增,，否則實驗無效。對沒有擴增產物的樣品,，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染,。