牛副流感病毒3型RT-PCR試劑盒

Bovine Parainfluenza Virus 3(BPIV-3)

產(chǎn)品及特點(diǎn)

牛副流感病毒 3 型（BPIV3）是引起牛呼吸系統(tǒng)疾病的主要病原，廣泛分布 于世界養(yǎng)牛業(yè)發(fā)達(dá)地區(qū),，BPIV3 常與其他病毒或細(xì)菌混和感染或繼發(fā)感染,，對(duì)養(yǎng) 牛業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。本產(chǎn)品根據(jù) PCR 原理開發(fā),，可用于科研領(lǐng)域快速檢測(cè) 牛副流感病毒 3 型,。它具有下列特點(diǎn)：

1. 一站式，用于不需要單獨(dú)準(zhǔn)備每種成分,，包括引物和對(duì)照,。

2. 根據(jù)牛副流感病毒 3 型的保守基因序列設(shè)計(jì)的引物，具有良好的特異性,。

3. 靈敏度可以達(dá)到 1000 拷貝/反應(yīng),。

4. 使用一管式 RT-PCR 技術(shù)，RT 和 PCR 兩步在一個(gè)試管內(nèi)完成,，不需要中間 轉(zhuǎn)移樣品,，降低了操作誤差和可能的污染。

5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的 RT-PCR,。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研,，不能用于臨床。 

牛副流感病毒3型RT-PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,，-20℃保存，保存期限為 12 個(gè)月,。收到貨后陽性對(duì)照需要跟其他成分 分開放置,，因?yàn)槠淙菀孜廴酒渌煞郑斐杉訇栃浴?nbsp;

自備試劑 樣品RNA

使用方法 一,、樣品 RNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取,，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽性 對(duì)照）,，一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）,。可以用 10μL 藍(lán)舌病病毒 PCR 陽 性對(duì)照的 10000 倍稀釋的（稀釋后濃度為 1×10E4 拷貝/μL,，10μL 相當(dāng)于 1 萬拷貝,，可以將 10μL 原液加入到 990μL 自備 TE 溶液中，充分混勻,，此 為 100 倍稀釋液,。再取 10μL 此稀釋液加入到 990μL 自備 TE 溶液中，充分 混勻,，此為 10000 倍稀釋液）再加上一定量的水作為制備的陽性對(duì)照（加水 后其總體積跟樣品一樣,，樣品體積多少取決于所用試劑盒的要求）?？梢杂盟?作為制備的陰性對(duì)照,。制備所得成為樣品 RNA。

2. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 RNA,，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒 RNA 提 取試劑盒兼容,。

二、設(shè)置 RT-PCR 反應(yīng)（20μL 體系）

3. 如果有 N+2 個(gè)樣品,，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管（額外增加的兩個(gè)管一個(gè)是 RT-PCR 陽性對(duì)照,，另一個(gè)是 RT-PCR 陰性對(duì)照）并按照下表在 PCR 管中 加入下列成分： 

4. 上機(jī)進(jìn)行 RT-PCR，RT-PCR 反應(yīng)參數(shù)為: 

5. 瓊脂糖電泳檢測(cè)擴(kuò)增效果,，陽性樣品預(yù)期得到的擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度為 273bp,。如 果陰性對(duì)照有此擴(kuò)增產(chǎn)物或陽性對(duì)照無此擴(kuò)增產(chǎn)物，則說明實(shí)驗(yàn)失敗,，需要 分析實(shí)驗(yàn)失敗的原因,。只有在陰性對(duì)照沒有此擴(kuò)增產(chǎn)物、陽性對(duì)照有此擴(kuò)增 產(chǎn)物的情況下,，才有必要分析樣品的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,，如果有此擴(kuò)增產(chǎn)物則為陽性， 如果無則為陰性,。