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供貨周期	一周	規(guī)格	50T
貨號	XY-0139	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴增效率,、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性,。

牛皰疹病毒1型PCR試劑盒

Bovine Hepervirus 1 (BHV-1)

產(chǎn)品及特點

牛皰疹病毒 1 型（Bovine herpesvirus 1,，BoHV-1）引起牛的傳染性鼻氣管炎,，又稱壞死性鼻炎、紅鼻病,，表現(xiàn)上呼吸道及氣管黏膜發(fā)炎,、呼吸困難、流鼻汁等癥狀,，BHV-1 還可引起生殖道感染,、結(jié)膜炎、腦膜腦炎,、流產(chǎn),、乳房炎等多種病癥,。該病被 OIE 列為 B 類傳染病，也被我國列為二類動物傳染病,，其易感染性和潛伏性給畜牧業(yè)以及貿(mào)易帶來嚴重的經(jīng)濟損失,，因此牛皰疹病毒 1 型的快速準確鑒定對該病的預(yù)防和檢疫有著重要作用，本產(chǎn)品具有下列特點：

1. 即開即用,，用戶只需要提供 DNA 模板,。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強,，只擴增牛皰疹病毒 1 型 DNA,，與其他病毒沒有交叉反應(yīng)。

3. 提供陽性對照,，便于區(qū)分假陰性樣品,。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳,。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,，但只能用于科研。

牛皰疹病毒1型PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號	成分	規(guī)格
試劑一	PCR MagicMix 3.0	1 mL（紅蓋）
試劑二	超純水	1 mL（亮黃色）
試劑三	牛皰疹病毒 1 型 PCR 引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑四	牛皰疹病毒 1 型 PCR 陽性對照（1×10E8 拷貝/μL）	50 μL（黃蓋））
試劑五	天凈沙核酸釋放劑（試用裝）	20 次（1 mL,，綠蓋）
試劑六	使用手冊	1 份

運輸及保存 低溫運輸,，-20℃保存，保存期限為一年,。陽性對照需要單獨放置,，不要污染其他試劑。

自備試劑樣品 DNA,。

使用方法 一,、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容,。

2. 如果有 N 個樣品,，則需要做 N+2 個提取，包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照,。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL 芽孢桿菌通用 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋液而得,，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放冰上待用,。

二,、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性對照,，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng),。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分：

成分	樣品管 N+2 個	PCR 陰性對照管	PCR 陽性對照
PCR Magic Mix 3.0	各20 μL	20 μL	20 μLL
牛皰疹病毒 1 型PCR引物混合液	各2 μL	2 μL	2 μL
N+2 個樣品 DNA 模板	各 18 μL
PCR 陰性對照（水）		18 μL
PCR 陽性對照（牛皰疹病毒 1 型 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋液）			18 μL

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

過程	溫度	時間
預(yù)變性	95℃	5 min
PCR反應(yīng) （35個循環(huán)）	95℃	45 sec
	54℃	45 sec
	72℃	30 sec
后延伸	72℃	10 min

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物,。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物,。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴增結(jié)束后可以直接上樣,，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),，陰性對照必須無任何擴增,，否則實驗無效,。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品,，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。