藍(lán)舌病病毒通用RT-PCR試劑返回列表頁

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參考價: ￥ 1990 ￥ 1790

訂貨量: 1-4 Kg ≥5 Kg

具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號50次

品牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所在地上海

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更新時間：2020-07-24 15:56:10瀏覽次數(shù)：512次

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產(chǎn)品分類品牌分類

PCR試劑盒: PCR-染料法 PCR-探針法

全部產(chǎn)品列表

產(chǎn)品簡介

供貨周期	一周	規(guī)格	50T
貨號	XY-0121	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率,、更高的擴(kuò)增靈敏度,、更高的擴(kuò)增特異性。

藍(lán)舌病病毒通用RT-PCR試劑盒會引起鮑病毒病,，危害的主要對象是我國南方養(yǎng)殖的九孔鮑,、雜色鮑，北方地區(qū)養(yǎng)殖的皺紋盤鮑,。該病潛伏期短,，發(fā)病急，傳染性強(qiáng),，死亡率高,，造成鮑種苗及成鮑的大量死亡，4～30d 內(nèi)死亡率高達(dá) 95%以上,，溶藻膠弧菌和副溶血弧菌可能會和病毒共同感染鮑并且是鮑病的共同致病因子,。

詳情介紹

藍(lán)舌病病毒通用RT-PCR試劑盒

Bluetongue Virus(BTV)

產(chǎn)品及特點(diǎn)

藍(lán)舌病病毒(Bluetongue Virus，BTV)會引起藍(lán)舌病,，是反芻動物的一種嚴(yán) 重傳染病,。以口腔、鼻腔和胃腸道黏膜發(fā)生潰瘍性炎癥變化為特征,，病羊乳房和蹄部也常出現(xiàn)病變,，且常因蹄真皮層遭受侵害而發(fā)生跛行，該病毒主要侵害綿羊,，對養(yǎng)羊業(yè)造成嚴(yán)重?fù)p害,，因此靈敏快捷的診斷產(chǎn)品具有重要的意義,。為此本公司基于 RT-PCR 原理開發(fā)了本產(chǎn)品，可用于在科研領(lǐng)域快速定量檢測藍(lán)舌病病毒,。它具有下列特點(diǎn)：

1. 一站式,，用于不需要單獨(dú)準(zhǔn)備每種成分，包括引物和對照,。

2. 根據(jù)藍(lán)舌病病毒的保守基因序列設(shè)計的引物,，具有良好的特異性。

3. 靈敏度可以達(dá)到 1000 拷貝/反應(yīng),。

4. 使用一管式 RT-PCR 技術(shù),，RT 和 PCR 兩步在一個試管內(nèi)完成，不需要中間轉(zhuǎn)移樣品,，降低了操作誤差和可能的污染,。

5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的 RT-PCR。

6. 本產(chǎn)品參考國標(biāo) GB/T18636-2017 開發(fā),，只能用于科研,，不能用于臨床。

藍(lán)舌病病毒通用RT-PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號	成份	規(guī)格
試劑一	5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer	200 μL（橙色蓋）
試劑二	MMLV-Taq Mix	75 μL（紅蓋）
試劑三	超純水	1 mL（藍(lán)色蓋）
試劑四	藍(lán)舌病病毒通用 RT-PCR 引物混合	100 μL（白蓋）
試劑五	藍(lán)舌病病毒通用 RT-PCR 陽性對照（1×10E8 拷貝/μL）	50 μL（黃蓋）
試劑六	天凈沙核酸釋放劑試用裝	20 次（1mL,，綠蓋）
試劑七	使用手冊	1 份

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存,，保存期限為 12 個月,。收到貨后陽性對照需要跟其他成分分開放置，因為其容易污染其他成分,，造成假陽性,。

自備試劑 樣品RNA

使用方法 一、樣品 RNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品,，必須設(shè)置 N+2 個提取,，多出的一個是 PC（樣品制備陽性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）,?？梢杂?10μL 藍(lán)舌病病毒 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋的（稀釋后濃度為 1×10E4 拷貝/μL,，10μL 相當(dāng)于 1 萬拷貝，可以將 10μL 原液加入到 990μL 自備 TE 溶液中,，充分混勻，此為 100 倍稀釋液,。再取 10μL 此稀釋液加入到 990μL 自備 TE 溶液中,，充分混勻，此為 10000 倍稀釋液）再加上一定量的水作為制備的陽性對照（加水后其總體積跟樣品一樣,，樣品體積多少取決于所用試劑盒的要求）,?？梢杂盟?作為制備的陰性對照。制備所得成為樣品 RNA,。

2. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 RNA,，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 RNA 提取試劑盒兼容。

二,、設(shè)置 RT-PCR 反應(yīng)（20μL 體系）

3. 如果有 N+2 個樣品,，則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管（額外增加的兩個管一個是 RT-PCR 陽性對照，另一個是 RT-PCR 陰性對照）并按照下表在 PCR 管中加入下列成分：

成分	N+2 個樣品管	RT-PCR陰性對照	RT-PCR陽性對照
5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer	各 4 μL	4 μL	4 μL
藍(lán)舌病病毒通用 RT-PCR 引物混合液	各2μL	2μL	各2μL
N+2 個制備的 RNA 樣品	各12.5 μL
超純水		12.5 μL
藍(lán)舌病病毒通用 RT-PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋液			12.5 μL
MMLV-Taq Mix	1.5 μL	1.5 μL	1.5 μL

4. 上機(jī)進(jìn)行 RT-PCR,，RT-PCR 反應(yīng)參數(shù)為:

過程	溫度	時間
逆轉(zhuǎn)錄	42℃	60 分鐘
預(yù)變性	95℃	5 分鐘
RT - PCR反應(yīng) （30個循環(huán)）	95℃	30 秒
	58℃	30 秒
	72℃	30 秒
延伸	72℃	5 分鐘

5. 瓊脂糖電泳檢測擴(kuò)增效果,，陽性樣品預(yù)期得到的擴(kuò)增產(chǎn)物長度為 273bp。如果陰性對照有此擴(kuò)增產(chǎn)物或陽性對照無此擴(kuò)增產(chǎn)物,，則說明實驗失敗,，需要分析實驗失敗的原因。只有在陰性對照沒有此擴(kuò)增產(chǎn)物,、陽性對照有此擴(kuò)增產(chǎn)物的情況下,，才有必要分析樣品的實驗結(jié)果，如果有此擴(kuò)增產(chǎn)物則為陽性,，如果無則為陰性,。