球孢白僵菌PCR試劑盒

Beauveria bassiana

產(chǎn)品及特點(diǎn)

球孢白僵菌（Beauveria bassiana）屬于子囊菌門(mén),、肉座菌目、蟲(chóng)草菌科,、 白僵菌屬,，是廣譜性昆蟲(chóng)病原真菌，主要進(jìn)行無(wú)性繁殖,，產(chǎn)生分生孢子;可進(jìn) 行有性生殖并產(chǎn)生子實(shí)體,，被鑒定為球孢蟲(chóng)草。球孢白僵菌在世界范圍被用 于害蟲(chóng)生物防治,，其中我國(guó)使用球孢白僵菌防治馬尾松毛蟲(chóng)和玉米螟是 上大的害蟲(chóng)防治項(xiàng)目,，取得良好的害蟲(chóng)持續(xù)控制效果。球孢白僵菌也能感 染家蠶等經(jīng)濟(jì)昆蟲(chóng),，感染家蠶幼蟲(chóng)干燥后的尸體稱為僵蠶,。入藥能祛風(fēng)、鎮(zhèn) 驚等,。由于加強(qiáng)防治,，近年來(lái)白僵菌對(duì)家蠶的感染大為減少，為解決僵蠶的 藥源問(wèn)題,，以蠶蛹為原料,，接入白僵菌，所得蠶蛹可代僵蠶用,。本產(chǎn)品是根 據(jù) PCR 原理開(kāi)發(fā)的球孢白僵菌檢測(cè)試劑盒,，它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開(kāi)即用，用戶只需要提供 DNA 模板,。

2. 引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)球孢白僵菌，與其他病原沒(méi)有交叉反 應(yīng),。,。

3. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品,。

4. PCR mix 中含上樣染料,，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,，但只能用于科研,。

球孢白僵菌PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存,，保存期限為一年,。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑,。  

自備試劑 樣品 DNA,。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA,，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容,。

2. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要做 N+2 個(gè)提取,，包括一個(gè)樣品制備陽(yáng)性對(duì)照和一 個(gè)樣品制備陰性對(duì)照,。樣品制備陽(yáng)性對(duì)照是在適量水（取決于試劑盒要求 的樣品起始量）中加 10μL 蠟狀芽孢桿菌 PCR 陽(yáng)性對(duì)照的 10000 倍稀釋 液而得，樣品制備陰性對(duì)照是直接用水,。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放 冰上待用,。

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品,，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照,，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三,、電泳檢測(cè)

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物,。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,，不需要另外再加 loading buffer,。PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò)增,，否則實(shí) 驗(yàn)無(wú)效,。對(duì)沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染,。