對蝦桿狀病毒PCR試劑盒

Baculovirus Penaei(BP)

產(chǎn)品及特點(diǎn)

對蝦桿狀病毒(Baculovirus Penaei)是一種能在細(xì)胞核內(nèi)產(chǎn)生金字塔狀的包涵體的病毒，會引起對蝦的肝胰腺或中腸上皮細(xì)胞核內(nèi)由于感染多角體桿狀病毒而引起的多種對蝦的急性傳染病,。除了死亡特征外,，受BP感染的蝦也表現(xiàn)為攝餌減少，生長速度降低,，蝦體表面因附生或共棲生物增多而出現(xiàn)爛鰓或細(xì)菌的混合感染等非特定癥狀,，對野生對蝦資源有巨大危害,，因此快速檢測對蝦桿狀病毒具有重要意義。本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn)：

1. 即開即用,，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,，專一性強(qiáng),，只擴(kuò)增對蝦桿狀病毒，與其他病毒沒有交叉反應(yīng),。

3. 提供陽性對照,，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料,，PCR 后可以直接上樣電泳,。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研,。

對蝦桿狀病毒PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,，-20℃保存，保存期限為一年,。陽性對照需要單獨(dú)放置,，不要污染其 他試劑。  

自備試劑 樣品 DNA,。

使用方法 一,、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容,。

2. 如果有 N 個樣品,，則需要做 N+2 個提取，包括一個樣品制備陽性對照和一 個樣品制備陰性對照,。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求 的樣品起始量）中加 10μL 蠟狀芽孢桿菌 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋 液而得,，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放 冰上待用,。

二,、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照,，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng),。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物,。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物,。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer,。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),，陰性對照必須無任何擴(kuò)增,，否則實(shí) 驗(yàn)無效。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品,，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染,。