蠟狀芽孢桿菌PCR試劑盒

Bacillus cereus

產(chǎn)品及特點(diǎn)

芽孢桿菌屬(Bacillus)中的一種。菌體細(xì)胞桿狀,，末端方,，成短或長鏈， 1.0~1.2×3.0~5.0 微米,。產(chǎn)芽孢,，芽孢圓形或柱形，中生或近中生,，1.0~1.5 微米,， 孢囊無明顯膨大。革蘭氏陽性,，無莢膜,，運(yùn)動。菌落大,，表面粗糙,， 扁平，不規(guī)則,。會引起食物中毒,，中毒者癥狀為腹痛、嘔吐腹瀉,。蠟狀芽孢桿 菌可產(chǎn)生抗菌物質(zhì),，抑制有害微生物的繁殖，降解土壤中的營養(yǎng)成分,，改善 生態(tài)環(huán)境,。可產(chǎn)生細(xì)菌蛋白酶,；可用于麻脫膠,，是各種抗生素抗菌活性的測 定菌?？捎糜诿髂z液化,，牛奶胨化，還原硝酸鹽,，水解淀粉,。本產(chǎn)品是根據(jù) PCR 原理開發(fā)的蠟狀芽孢桿菌檢測試劑盒，它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開即用,，用戶只需要提供 DNA 模板,。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng),，只擴(kuò)蠟狀芽孢桿菌,，與其他病原沒有交叉 反應(yīng),。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品,。

4. PCR mix 中含上樣染料,，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,，但只能用于科研,。

蠟狀芽孢桿菌PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存,，保存期限為一年,。陽性對照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑,。  

自備試劑 樣品 DNA,。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA,，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容,。

2. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要做 N+2 個(gè)提取,，包括一個(gè)樣品制備陽性對照和一 個(gè)樣品制備陰性對照,。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求 的樣品起始量）中加 10μL 蠟狀芽孢桿菌 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋 液而得，樣品制備陰性對照是直接用水,。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放 冰上待用,。

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個(gè)樣品,，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對照和一個(gè) PCR 陰性 對照,，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三,、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物,。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,，不需要另外再加 loading buffer,。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴(kuò)增,，否則實(shí) 驗(yàn)無效,。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染,。