禽腺病毒PCR試劑盒

Avian Adenovirus

產(chǎn)品及特點

禽腺病毒(Avian Adenovirus) 是家禽常見的感染病原體,，大部分腺病毒可 以在健康禽類體內(nèi)復(fù)制,，與傳染性法氏囊疾病共同感染可增強(qiáng)感染禽腺病毒的 致病性，共同感染雞貧血病毒會增強(qiáng)禽腺病毒引起肝炎和致死能力,，臨床癥狀 主要有包涵體肝炎和心包積水綜合癥等,，會影響產(chǎn)蛋率和蛋殼質(zhì)量，引起呼吸 道感染等,，對養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重?fù)p害,。因此快速檢測禽腺病毒具有重要意義。本 產(chǎn)品是根據(jù) PCR 原理開發(fā)檢測禽腺病毒的試劑盒,，它具有下列特點：

1. 即開即用,，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,，專一性強(qiáng),，只擴(kuò)增非洲豬瘟病毒，與其他病原沒有交 叉反應(yīng),。

3. 提供陽性對照,，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料,，PCR 后可以直接上樣電泳,。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,，但只能用于科研。

禽腺病毒PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸,，-20℃保存,，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,，不要污染其 他試劑,。  

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一,、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA,，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容。

2. 如果有 N 個樣品,，則需要做 N+2 個提取,，包括一個樣品制備陽性對照和一 個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求 的樣品起始量）中加 10μL 非洲豬瘟病毒 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液 而得,，樣品制備陰性對照是直接用水,。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放冰 上待用。

二,、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品,，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng),。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三,、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物,。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),，陰性對照必須無任何擴(kuò)增,，否則實 驗無效,。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品,，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。