利用抗原親和純化多抗問(wèn)題

首先,，western blot不能用來(lái)說(shuō)明抗體效價(jià),，而需要在嚴(yán)格確定抗原濃度的情況下,，通過(guò)ELISA等實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō)明,。因?yàn)閃B檢測(cè)的抗原蛋白是一種變性伸展的狀態(tài),，而非活性狀態(tài),；
第二,，1:200的抗血清稀釋度（甚至1:20）可以得到背景較小的條帶，你的實(shí)驗(yàn)可能需要充分washing及blocking,，以減少非特異性吸附,。
第三，不知你用什么方法染色,？注意時(shí)間不要太長(zhǎng),，能看到你的條帶即可，一般用DAB染色不超過(guò)5min（2～3min,，37 C）,。