（1）吸光度太高,，一方面可能偏離朗伯比爾定律,，吸光度變化不再呈線性關(guān)系；另一方面會(huì)導(dǎo)致吸光度變化不靈敏,。因此,，吸光度不宜太高,。如果可以，盡量控制在1以下,。
（2）構(gòu)成本底吸光度是樣品提取液含有在該波長(zhǎng)產(chǎn)生強(qiáng)烈光吸收的其它物質(zhì),，或者在測(cè)定光吸收減少速率的反應(yīng)中，人為添加的底物在該波長(zhǎng)下造成的光吸收,。
（3）如果是前者造成的,，那么可以通過(guò)用對(duì)照再次調(diào)零,，把本底光吸收消除,。
（4）如果是后者，那么只能接受,?；蛘呖头纯茨芊駵p少底物濃度,。不過(guò),，大家知道，對(duì)于酶來(lái)說(shuō),，底物濃度通常要求≥10Km,。
至于吸光度超過(guò)分光光度計(jì)測(cè)量范圍，通常是兩種情況,，紫外應(yīng)該用石英比色皿,，錯(cuò)用了玻璃比色皿；或者比色皿不透光一面對(duì)著光源,。其它情況還包括比色皿太臟,，或者提取液本身顏色太深等。