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大鼠淀粉樣前體蛋白(APP)ELISA試劑盒的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,,又保留酶的活性。在測定時,,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng),。
大鼠淀粉樣前體蛋白(APP)ELISA試劑盒標(biāo)本及采集、貯運(yùn)因素
嚴(yán)重溶血 ,,以 HRP 為標(biāo)記的ELISA 測定中,,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽性; 混有紅細(xì)胞的血清 易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈;如有 細(xì)菌污染 ,,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng); 標(biāo)本凝固不全 ,有時為了爭取時間快速檢測,,常在血液還未開始凝固時即強(qiáng)行離心分離血清,,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在大鼠淀粉樣前體蛋白(APP)ELISA試劑盒測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,,易造成假陽性結(jié)果; 采血試管洗滌不* ,、反復(fù)使用易交叉污染; 塑料試管能吸附抗原物質(zhì) ,樣本久置在塑料管內(nèi)會使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性,。
大鼠淀粉樣前體蛋白(APP)ELISA試劑盒血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測,,嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。一般說來,,在 5 天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,,標(biāo)本在冰箱中保存時間過長導(dǎo)致血清IgG 聚合,使間接法的 試劑 本底加深,。超過一周測定的需-20℃保存,。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,,分布不均,,應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡?;鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測。反復(fù)凍融會使 抗體 效價跌落,,所以測 抗體 的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測,,宜少量分裝冰存;使用一次性玻璃試管或真空管采血管;并使用非抗凝標(biāo)本,肝素抗凝血漿會增加OD值,,可能與高濃度肝素具有強(qiáng)大的負(fù)電荷能吸附酶標(biāo)記物不易洗脫有關(guān);EDTA,、酶抑制劑(如NaN3)可抑制大鼠淀粉樣前體蛋白(APP)ELISA試劑盒系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性;血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標(biāo)本采集時用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?/span>
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