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五洲鼎創(chuàng)QM100高通量組織研磨儀
在酵母細(xì)胞低溫破碎中的使用說(shuō)明
條形酵母是將酵母通過(guò)小孔注入到裝有液體氮的氣罐中壓縮制成的,。將有1mm的篩子扣入到裝有10-20 ml球狀酵母的50ml破碎罐的頂部,,經(jīng)過(guò)離心破碎變成了2L的條狀物。壓力是由人工用60ml的自由活塞注射器注入罐內(nèi),,條狀可以在-80C°下被保存。
將不銹鋼破碎罐、破碎球和裝有條狀酵母的器皿放入到用聚苯乙烯盒子盛放液體氮中,,當(dāng)預(yù)冷凍過(guò)程結(jié)束后,原來(lái)沸騰的液體氮恢復(fù)平靜
將破碎罐從池中取出,,并要將破碎罐沾有的液體全部清理干凈,,以避免在破碎過(guò)程中發(fā)生爆炸。破碎罐,、破碎球和器皿好用有把手的煤氣鉗或坩鍋鉗拿取,,而且通常要帶經(jīng)過(guò)冷凍的手套。
將破碎球和條狀酵母移入破碎罐中,。罐中裝有一半的條狀酵母,,易碎的條狀酵母被破碎球預(yù)冷凍的抹刀破碎,酵母的數(shù)量不要超過(guò)破碎罐體積的1/3,,否則破碎的效率就會(huì)變得很底下,。
然后將破碎罐蓋緊,在安裝在破碎機(jī)之前將破碎罐再次放入到液體氮中幾秒鐘,,然后將破碎罐夾緊,。
破碎次數(shù)為5次,,每次3分鐘,功率為30hz,。在每次破碎后都要將破碎罐取下,,放入到裝有液體氮的水池中。當(dāng)水池沸騰后,,破碎可以繼續(xù)進(jìn)行,。所需樣本后可以得到,而且也通過(guò)顯微鏡可以看到有價(jià)值的破碎過(guò)程,。
經(jīng)過(guò)15分鐘的破碎后,,我們發(fā)現(xiàn)90%的酵母已經(jīng)達(dá)到破碎效果。
剩余的殘?jiān)换厥盏?0ml的器皿中以備后用或貯存,。然后用一種具有永磁性的磁鐵把破碎球從殘?jiān)形龌厥铡?/span>
破碎罐和破碎球可以用溫的乙醇清洗,,放到干燥處貯存。
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