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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級會員·13年您現在的位置： 翌圣生物科技（上海）股份有限公司>>生物醫(yī)藥>>mRNA疫苗與藥物>> 10628ESHieff® T7 RNA Polymerase (low dsRNA, 250 U/μL
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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 生物產業(yè),制藥/生物制藥 |
|---|
產品介紹
產品詳情
產品介紹
本產品是大腸桿菌重組表達來源的噬菌體 T7 RNA 聚合酶,，是對野生型T7進行了改造優(yōu)化，突變得到的可以大幅度降低dsRNA含量的T7 RNA 聚合酶,。以含有 T7 啟動子序列的雙鏈 DNA 為模板,，以 NTP 為底物，合成與啟動子下游的反向單鏈 DNA 互補的RNA,。雙鏈線性平末端或 5’突出末端 DNA均可作為 T7 RNA 聚合酶的底物模板,，因此線性質粒、PCR 產物均可用作體外合成 RNA 的模板,。
產品特色
1. 高效低dsRNA合成
dsRNA含量顯著降低：與傳統(tǒng)T7 RNA聚合酶相比,，dsRNA含量降低了至少10倍以上，有效避免了dsRNA引發(fā)的免疫激活和對mRNA功能的干擾,。
高產量：mRNA產量穩(wěn)定在9mg/mL以上,，滿足大規(guī)模生產的需要。
高完整度：轉錄產物的完整度不低于野生型T7 RNA聚合酶,，確保mRNA的質量和功能,。
2. 高效加帽與低投入
高加帽率：片段加帽率均超過99%，確保mRNA的穩(wěn)定性和翻譯效率,。
低Cap analog投入量：在不同片段長度下,，Cap analog投入量降低至2.5mM，仍能實現優(yōu)異的加帽率,，顯著降低了生產成本,。
3. 優(yōu)化的篩選與驗證
雙重篩選策略：通過構建隨機文庫與FADS高通量篩選方法,，以及半理性設計與微孔板技術，篩選出超過10^6的隨機突變文庫,，最終選出一款性能的突變體進行商品化應用,。
產品特性：
| 來源 | 重組 E. coli |
| 最適溫度 | 37℃ |
| 活性 | 250 U/μL |
| 宿主核酸殘留 | <10 fg/U |
| 宿主蛋白殘留 | <50 ppm |
| RNA 酶殘留 | 陰性 |
| 儲存緩沖液 | 50mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT, 100 mM NaCl, 0.1% Triton X-100，50%（v/v）甘油,，pH7.9@25℃ |
| 活性單位定義 | 在 37℃,、pH8.0 的條件下，1 h 內使 1 nmol 的 [3H] GMP 摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定義為一個活性單位,。 |
應用案例
1,、 在不同長度的應用場景下，dsRNA無論跟WT T7 ,，還是競品,，在保證其他指標不降的前提下，dsRNA 均有極顯著下降,。
| 片段長度 | T7 RNA pol | 產量（mg/mL） | 完整度（%） | dsRNA含量（(1ug RNA產生 ng的dsRNA) |
| 4K | T7-WT | 12.4 | 88.3 | 0.4273 |
| T7-低dsRNA | 12.1 | 89.9 | 0.0129 | |
| 競品A | 11.0 | 87.8 | 0.0323 | |
| 9K | T7-WT | 9.5 | 81.9 | 2.9180 |
| T7-低dsRNA | 9.0 | 82.0 | 0.0379 | |
| 競品A | 7.2 | 78.7 | 0.1805 |
2,、降低Cap analog的投入量，在不同的片段長度,，以及與WT的對比下,，投入量降低到2.5mM， 仍能得到優(yōu)異的加帽率,。同時在細胞層面上，也能得到優(yōu)異的表現,。
| Cap analog投入量（mM） | 加帽率（%）-4K | 1K | |
| WT | mutant | WT | |
| 10 | 100 | 100 | 100 |
| 5 | 100 | 100 | 100 |
| 2.5 | 100 | 100 | 99.7 |
存儲條件
-25 ~ -15℃保存,，有效期1年,。
