正反性色譜柱的區(qū)別
閱讀:1991 發(fā)布時間:2017-7-24
在正相色譜中,,一般采用極性鍵合固定相,硅膠表面鍵合的是極性的有機基團,,鍵合相的名稱由鍵合上去的基團而定,。zui常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2),、二醇基(DIOL)鍵合相,。流動相一般用比鍵合相極性小的非極性或弱極性有機溶劑,如烴類溶劑,,或其中加入一定量的極性溶劑(,、醇、乙腈等),,以調(diào)節(jié)流動相的洗脫強度,。通常用于分離極性化合物。一般認為正相色譜的分離機制屬于分配色譜,。組分的分配比K值,,隨其極性的增加而增大,但隨流動相中極性調(diào)節(jié)劑的極性增大(或濃度增大)而降低,。同時,,極性鍵合相的極性越大,組分的保留值越大,。該法主要用于分離異構(gòu)體,,極性不同的化合物,特別是用來分離不同類型的化合物,?! ≡诜聪嗌V中,一般采用非極性鍵合固定相,如硅膠-C18H37(簡稱ODS或C18)硅膠-苯基等,,用強極性的溶劑為流動相,,如甲醇/水,乙腈/水,,水和無機鹽的緩沖液等,。 正相色譜和反相色譜的區(qū)別: 本質(zhì)上是填料(固定相)的不同,正相色譜柱填料極性強,洗脫順序由弱到強;反相色譜柱填料極性弱,,洗脫順序由強到弱,。 1,、正相色譜 正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica)以及其他具有極性官能團胺基團,,如(NH2,APS)和氰基團(CN,,CPS)的鍵合相填料,。 由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他極性基團極性較強,因此,,分離的次序是依據(jù)樣品中各組分的極性大小,,即極性較弱的組份zui先被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低,,如正已烷(Hexane),,(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等,?! ?、反相色譜 反相色譜用的填料常是以硅膠為基質(zhì),,表面鍵合有極性相對較弱官能團的鍵合相,。反相色譜所使用的流動相極性較強,通常為水,、緩沖液與甲醇,、乙腈等的混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強的組分zui先被沖洗出,,而極性弱的組分會在色譜柱上有更強的保留,。 常用的反相填料有:C18(ODS),、C8(MOS),、C4(Butyl)、C6H5(Phenyl)等,?! ”本﹪V科技有限公司專業(yè)生產(chǎn):紫外分析儀,、三用紫外分析儀、暗箱式紫外分析儀,、暗箱三用紫外分析儀,、暗箱紫外分析儀、手提式紫外分析儀,、三用紫外分析儀暗箱式,、紫外檢測儀、部分收集器,、恒流泵,、蠕動泵、凝膠成像系統(tǒng),、凝膠成像分析系統(tǒng)、化學發(fā)光成像分析系統(tǒng),、光化學反應儀,、旋渦混合器、漩渦混合器,、玻璃層析柱,、梯度混合器、梯度混合儀,、核酸蛋白檢測儀,、玻璃層析柱、熒光增白劑測定儀,、餾分收集器,、切膠儀、藍光切膠儀,、層析系統(tǒng)等產(chǎn)品,。咨詢