正反性色譜柱的區(qū)別
閱讀:2019 發(fā)布時(shí)間:2017-7-24
在正相色譜中,,一般采用極性鍵合固定相,,硅膠表面鍵合的是極性的有機(jī)基團(tuán),,鍵合相的名稱由鍵合上去的基團(tuán)而定,。zui常用的有氰基(-CN),、氨基(-NH2),、二醇基(DIOL)鍵合相。流動(dòng)相一般用比鍵合相極性小的非極性或弱極性有機(jī)溶劑,,如烴類溶劑,,或其中加入一定量的極性溶劑(、醇,、乙腈等),,以調(diào)節(jié)流動(dòng)相的洗脫強(qiáng)度。通常用于分離極性化合物,。一般認(rèn)為正相色譜的分離機(jī)制屬于分配色譜,。組分的分配比K值,隨其極性的增加而增大,,但隨流動(dòng)相中極性調(diào)節(jié)劑的極性增大(或濃度增大)而降低,。同時(shí),極性鍵合相的極性越大,,組分的保留值越大,。該法主要用于分離異構(gòu)體,極性不同的化合物,,特別是用來(lái)分離不同類型的化合物,。 在反相色譜中,,一般采用非極性鍵合固定相,,如硅膠-C18H37(簡(jiǎn)稱ODS或C18)硅膠-苯基等,用強(qiáng)極性的溶劑為流動(dòng)相,,如甲醇/水,,乙腈/水,水和無(wú)機(jī)鹽的緩沖液等,?! ≌嗌V和反相色譜的區(qū)別: 本質(zhì)上是填料(固定相)的不同,正相色譜柱填料極性強(qiáng),洗脫順序由弱到強(qiáng);反相色譜柱填料極性弱,,洗脫順序由強(qiáng)到弱?! ?,、正相色譜 正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica)以及其他具有極性官能團(tuán)胺基團(tuán),如(NH2,,APS)和氰基團(tuán)(CN,,CPS)的鍵合相填料。 由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他極性基團(tuán)極性較強(qiáng),,因此,,分離的次序是依據(jù)樣品中各組分的極性大小,即極性較弱的組份zui先被沖洗出色譜柱,。正相色譜使用的流動(dòng)相極性相對(duì)比固定相低,,如正已烷(Hexane),(Chloroform),,二氯甲烷(Methylene Chloride)等,。 2,、反相色譜 反相色譜用的填料常是以硅膠為基質(zhì),表面鍵合有極性相對(duì)較弱官能團(tuán)的鍵合相,。反相色譜所使用的流動(dòng)相極性較強(qiáng),,通常為水、緩沖液與甲醇,、乙腈等的混合物,。樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)的組分zui先被沖洗出,而極性弱的組分會(huì)在色譜柱上有更強(qiáng)的保留,?! 〕S玫姆聪嗵盍嫌校篊18(ODS)、C8(MOS),、C4(Butyl),、C6H5(Phenyl)等?! ”本﹪?guó)譜科技有限公司專業(yè)生產(chǎn):紫外分析儀,、三用紫外分析儀、暗箱式紫外分析儀,、暗箱三用紫外分析儀,、暗箱紫外分析儀、手提式紫外分析儀,、三用紫外分析儀暗箱式,、紫外檢測(cè)儀,、部分收集器、恒流泵,、蠕動(dòng)泵,、凝膠成像系統(tǒng)、凝膠成像分析系統(tǒng),、化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng),、光化學(xué)反應(yīng)儀、旋渦混合器,、漩渦混合器,、玻璃層析柱、梯度混合器,、梯度混合儀,、核酸蛋白檢測(cè)儀、玻璃層析柱,、熒光增白劑測(cè)定儀,、餾分收集器、切膠儀,、藍(lán)光切膠儀,、層析系統(tǒng)等產(chǎn)品。咨詢