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液相色譜柱正確使用方法
閱讀：1503 發(fā)布時(shí)間：2016-8-30
液相色譜柱正確使用方法
一,、樣品方面
1.除去微粒及雜質(zhì)
2.了解樣品在流動(dòng)相中的溶解度
如溶樣品的溶劑不是流動(dòng)相,，一定要用流動(dòng)相試溶解度，防止其在流動(dòng)相中析出
3.了解樣品與色譜柱的基質(zhì)/填料是否有相互作用
二,、流動(dòng)相方面
1.除去微粒
純度的要求：超純水,，梯度實(shí)驗(yàn)時(shí)水中有機(jī)雜質(zhì)含量要低;緩沖液的PH值，在填料的允許范圍內(nèi);緩沖液(鹽)的濃度;有機(jī)溶劑：色譜純,，雜質(zhì)含量盡量低，并與填料相匹配
2.流動(dòng)相對(duì)樣品的溶解度
有機(jī)溶劑或水的比例
三,、色譜柱的清洗
對(duì)所做的樣品要有充分的了解,，用對(duì)該樣品洗脫能力zui強(qiáng)的流動(dòng)相清洗
硅膠柱的一般方法是先用甲醇洗去極性雜質(zhì)，然后用干燥的二氯甲烷、正庚烷100~200ml依次活化
鍵合相柱(烷基)的一般方法是用20倍體積的甲醇-*仿-甲醇-水依次沖洗
(記?。好糠N色譜柱可能性有特定的方法,，一定要先看其使用說(shuō)明!)
四、色譜柱的存放
存放前的處理要除去雜質(zhì),、緩沖鹽
合適的存放溶劑
避免色譜柱床的干涸
避免機(jī)械震動(dòng)
防止細(xì)菌生長(zhǎng)
注意存放的溫度