微生物檢測用的玻璃器皿,、金屬用具及培養(yǎng)基,、被污染和接種的培養(yǎng)物等,，必須經(jīng)滅菌后方能使用,。
    一,、滅菌前準備
    1,、所有需經(jīng)滅菌的物品首先要清洗晾干，玻璃器皿如吸管,、平皿用紙包裝嚴密,，如用金屬筒應將上面氣孔打開。
    2,、裝培養(yǎng)基的三角瓶塞好棉塞,，用紙包好，試管蓋好蓋,，注射器須將管芯抽出,，用紗布包好。
    二,、裝放
    1,、大型高壓蒸氣鍋：放置滅菌物品不應超過鍋內容積的80%，物品應放置鍋內擱架上或鐵絲筐中,。
    2,、手提式高壓鍋：將物品分別包扎好,，直接放入消毒筒內，物品之間不能過擠,。
    三,、設備檢查
    1、檢查門的開關是否靈活,，橡皮圈有無損壞,，是否平整。
    2,、壓力表蒸氣排盡時是否停留在零位,，關好門和蓋，通蒸氣或加熱后,，觀察是否漏氣,，壓力表與溫度計所標示的狀況是否吻合，管道有無堵塞,。
    3,、對有自動電子程序控制裝置的滅菌器，使用前應檢查規(guī)定的程序,，是否符合于進行滅菌處理的要求,。
    四、滅菌處理
    手提式高壓鍋或立式壓力蒸氣滅菌器的使用應按下列步驟進行：
    1,、手提式高壓鍋在主體內加入3L清水,，立式高壓鍋加水16L（重復使用時應將水量補足，水變混濁需要更換）,。
    2,、手提式壓力鍋將頂蓋上的排氣管插入消毒桶內壁的方管中（無軟管或軟管銹蝕破裂的滅菌器不得使用）。
    3,、蓋好頂蓋擰緊,，勿使漏氣；置滅菌器于火源上加熱,，立式壓力鍋通上電源,，并打開頂蓋上的排氣閥放出冷氣（水沸騰后排氣10~15min）。
    4,、關閉排氣閥,，使蒸氣壓上升到規(guī)定要求，并維持規(guī)定時間（按滅菌物品性質與有關情況而定）,。
    5,、達到規(guī)定時間后，對需干燥的物品,，立即打開排氣閥排出蒸汽,，待壓力恢復到零時,，自然冷卻至60℃后開蓋取物，如為液體物品,，不要打開排氣閥,，而應立即將鍋去除熱源，待自然冷卻,，壓力恢復至零,，溫度降到60℃以下再打開蓋取物，以防止突然減壓液體劇烈沸騰活容器爆破,。
    五,、滅菌溫度與時間
    壓力蒸氣滅菌鍋滅菌溫度與時間見下表：
    六、滅菌處理
    滅菌后物品,，按正常情況已屬無菌,，從滅菌器中取出應仔細檢查，以免再度污染,。
    1,、物品取出,，隨即檢查包裝的完整性,，若有破壞或棉塞脫掉，不可作為無菌物品使用,。
    2,、取出的物品，如為包裝有明顯的水浸者,，不可作為無菌物品使用,。
    3、培養(yǎng)基或試劑等,，應檢查是否符合達到滅菌后的色澤或狀態(tài),，未達到者應廢棄。
    4,、取出的物品掉落在地或誤放不潔之處,，或沾有水液，均視為受到污染,，不可作為無菌物品使用,。
    5、取出的合格滅菌物品,，應存放于貯藏室或防塵柜內,，嚴禁與未滅菌物品混放。
    6,、凡屬合格物品,，應標有滅菌日期及有效期限,。
    7、每批滅菌處理完成后,，記錄滅菌品名,、數(shù)量、溫度,、時間,、操作者。