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農(nóng)藥殘留速測(cè)儀測(cè)定原理以及方法介紹

閱讀:2330發(fā)布時(shí)間:2018-4-8

農(nóng)藥殘留速測(cè)儀測(cè)定原理以及方法介紹
    1,、農(nóng)藥殘留速測(cè)儀檢測(cè)原理
  
  農(nóng)殘速測(cè)儀檢測(cè)原理是采用酶抑制法,,在一定條件下,。有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥能抑制膽堿酯酶的活性,,其抑制率與農(nóng)藥的濃度星正相關(guān)11-21,。在正常情況下,酶催化代謝產(chǎn)物水解.其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng),,產(chǎn)生黃色物質(zhì),,用分光光度計(jì)在410am處測(cè)定吸光度隨時(shí)間的變化值,,計(jì)算出抑制率,通過(guò)抑制率的大小可以判斷樣品中是否有高劑量的有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在,。
  
  2,、農(nóng)殘速測(cè)方法
  
  2.1試劑配制與保存
  
  2.1.1緩沖液。用量筒量取500mL蒸餾水,,先用少量(100一150mL)的蒸餾水緩緩倒入放有緩沖劑干粉的量杯中,,用玻棒攪拌至*溶解后將量筒中剩余的蒸餾水倒人量杯中充分?jǐn)嚢瑁〒u勻),待用,。
  
  2.1.2顯色劑,。用刻度吸管吸5.2mL緩沖液注入顯色劑瓶中,蓋上蓋搖勻,,置于0—5℃環(huán)境中備用,,切勿冷凍。
  
  2.1.3底物,。用刻度吸管吸5.2mL蒸餾水注入底物干粉瓶中,,蓋上蓋搖勻,置于嘰5cc環(huán)境中備用,。
  
  2.2樣液制備
  
  取干凈的蔬菜,,用天平準(zhǔn)確稱取2g,葉菜取葉片部分,,果菜橫截削下一片,,葉片、瓜肉等剪成Icm2,,置于100mL小燒杯內(nèi);用吸管吸10mL緩沖液注入小燒杯中,,振蕩提取2min左右,;提取結(jié)束后靜置2—3min,取上層清液作為樣液,。
  
  2.3儀器操作與樣品測(cè)定
  
  2.3.1儀器預(yù)熱,。接通電源,儀器自檢,,自檢結(jié)束后待機(jī)預(yù)熱10min.儀器工作穩(wěn)定后進(jìn)行測(cè)量13-71,。
  
  2.3.2對(duì)照測(cè)定。向檢測(cè)板zui左排比色孔中用的移液槍分別加10卜L酶試劑,,再用250斗L移液槍吸取250斗L緩沖液于比色孔,,按上下鍵選擇‘啟動(dòng)振板’菜單后按‘確認(rèn)’鍵啟動(dòng)振板10S,振板結(jié)束后,。讓酶試劑和緩沖液混合液靜置反應(yīng)10min,,用的移液槍向比色孔分別加入lO斗L顯色劑和10斗L底物,,立即將檢測(cè)板放入托盤,按‘對(duì)照’鍵測(cè)量(反應(yīng)時(shí)間設(shè)為lmin),。測(cè)試結(jié)束,,按‘確認(rèn)’鍵顯示對(duì)照吸光度變化值。待空白對(duì)照值的吸光度變化值在0.15加.30,,才可測(cè)定樣品,。否則要重新做空白測(cè)定。測(cè)量結(jié)束后儀器自動(dòng)保存當(dāng)前的對(duì)照值,,下一次測(cè)量樣品時(shí)就可以
  
  2.3.3樣品測(cè)定,。若已完成各通道的對(duì)照測(cè)試,將檢測(cè)板上所有比色孔作為樣品測(cè)量,。用不同移液槍分別給比色孔加酶液10‘L/孔,,加注樣品液250斗【/孔,顯色劑lO斗L/孔,。操作步驟同對(duì)照測(cè)試,,zui后按‘樣品’鍵測(cè)量,測(cè)試結(jié)束后,,顯示當(dāng)前測(cè)量的樣品抑制率結(jié)果和吸光度變化值,。可根據(jù)需要打印被測(cè)樣品抑制率,。
  
  2.3.4測(cè)試結(jié)果的判定,。測(cè)定結(jié)果以抑制率表示。根據(jù)GB/T5009.199—2003判定要求,,當(dāng)樣品對(duì)酶的抑制率≥50%時(shí),,表示蔬菜中有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在,樣品為陽(yáng)性結(jié)果,。陽(yáng)性結(jié)果的樣品需重復(fù)測(cè)2次以上,。

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