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塔板理論是Martin和Synger首先提出的色譜熱力學平衡理論,。它把色譜柱看作分餾塔,把組分在色譜柱內的分離過程看成在分餾塔中的分餾過程,,即組分在塔板間隔內的分配平衡過程,。
一、塔板理論的基本假設為:
1) 色譜柱內存在許多塔板,,組分在塔板間隔(即塔板高度)內*服從分配定律,,并很快達到分配平衡。
2) 樣品加在第0號塔板上,,樣品沿色譜柱軸方向的擴散可以忽略,。
3) 流動相在色譜柱內間歇式流動,,每次進入一個塔板體積。
4) 在所有塔板上分配系數(shù)相等,,與組分的量無關,。
雖然以上假設與實際色譜過程不符,如色譜過程是一個動態(tài)過程,,很難達到分配平衡,;組分沿色譜柱軸方向的擴散是不可避免的。但是塔板理論導出了色譜流出曲線方程,,成功地解釋了流出曲線的形狀,、濃度極大點的位置,能夠評價色譜柱柱效,。
二,、色譜流出曲線方程及定量參數(shù)(峰高h和峰面積A)
由色譜流出曲線方程可知:當t=tR時,濃度C有極大值,。Cmax就是色譜峰的峰高,。因此:①當實驗條件一定時(即σ一定),峰高h與組分的量C0(進樣量)成正比,,所以正常峰的峰高可用于定量分析,。②當進樣量一定時,σ越?。ㄖг礁撸?,峰高越高,因此提高柱效能提高HPLC分析的靈敏度,。
由流出曲線方程對V(0~∞)求積分,,即得出色譜峰面積A??梢夾相當于組分進樣量C0,,因此是常用的定量參數(shù)。把Cmax=h和Wh/2=2.355σ代入上式,,即得A=1.064×Wh/2×h,,此為正常峰的峰面積計算公式,。
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