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HPLC儀器的維護(hù)與保養(yǎng)(*期)

時(shí)間:2016/7/29閱讀:2549
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儀器的維護(hù)與保養(yǎng)(一)

 

        一套HPLC系統(tǒng)大致分為以下幾個(gè)部分:流動(dòng)相前處理部分,、輸液部分、進(jìn)樣部分,、分離部分,、檢測部分。下面將分兩期介紹各部分的使用方法和注意事項(xiàng),。*期先介紹流動(dòng)相前處理部分和輸液部分,。

一、流動(dòng)相前處理

       流動(dòng)相前處理主要包括過濾和脫氣,,使用設(shè)備主要為溶劑過濾器,、真空泵和超聲波。

      1,、過濾,。HPLC所用流動(dòng)相必須預(yù)先過濾和脫氣,過濾的作用是防止顆粒性的雜質(zhì)堵塞系統(tǒng),,或影響單向閥的正常工作,。過濾時(shí)需要注意濾膜的選擇,油膜和水系膜必須分開使用,。水膜易有機(jī)溶劑溶解而進(jìn)入系統(tǒng)導(dǎo)致泵流路和色譜柱頭的堵塞,。

      2、超聲,。超聲的作用是去除流動(dòng)相中的氣泡,。超聲時(shí)間一般在20min即可。超聲后,,液體溫度會(huì)升高,,應(yīng)冷卻到室溫再使用。超聲后的流動(dòng)相若需隔天使用再次超聲,。

二,、輸液系統(tǒng)

        輸液系統(tǒng)即是指高壓恒流泵,其作用是能提供穩(wěn)定準(zhǔn)確的流速,。泵的維護(hù)主要分為以下三個(gè)部分,。

       1、溶劑過濾頭,。吸液過濾頭,,或稱沉子,主要作用是過濾流動(dòng)相中可能存在的顆粒性雜質(zhì),。長時(shí)間使用后,,雜質(zhì)有可能阻塞溶劑過濾頭上的過濾板孔隙;或長時(shí)間使用緩沖液,,過濾頭表面容易產(chǎn)生一層膜,,阻礙流動(dòng)相正常通過,。嚴(yán)重時(shí),即使是已超聲過的溶劑,,泵吸液時(shí)也會(huì)有氣泡在四氟輸液管里產(chǎn)生,,因此應(yīng)經(jīng)常對過濾頭進(jìn)行清洗。清洗溶劑可以選擇乙醇或者30%稀硝酸溶液,,正相系統(tǒng)需注意濾頭的烘干處理,。

       2、單向閥,。單向閥的作用是確保液體向一個(gè)方向流動(dòng),,是高壓恒流泵穩(wěn)定輸液的保證。日常使用過程中,,可以通過觀察壓力的情況,,初步判斷流量是否正常。如果系統(tǒng)已經(jīng)平衡一段時(shí)間,,壓力應(yīng)該是穩(wěn)定的,。但如果壓力存在波動(dòng),則表明流量不穩(wěn)定,;如果無壓力,則表明無流量,。這兩種情況大多是因?yàn)閱蜗蜷y里混入了氣泡或雜質(zhì),。混入氣泡的情況,,應(yīng)把放空閥打開,,按沖洗鍵將里面的氣泡排出。單向閥混入雜質(zhì)的情況,,須對其進(jìn)行清洗,。清洗溶劑可以選擇乙醇,安裝時(shí)注意標(biāo)記環(huán)的方向,。

 

                                                           單向閥裝配圖及剖面圖

                       1 帶標(biāo)記環(huán)閥外套,;2 陶瓷座;3 寶石球,;4 帶密封墊限位套,;5 密封墊

 

       3、密封圈,。密封圈是固定在柱塞桿上防止泵腔內(nèi)的液體泄漏,,是保證泵頭輸液正常的關(guān)鍵部件。但柱塞桿和柱塞密封圈長期使用會(huì)發(fā)生磨損,,主要與流量,、操作壓力和所使用的流動(dòng)相有關(guān),。當(dāng)使用含鹽的流動(dòng)相時(shí),由于脫水或蒸發(fā),,可能形成鹽結(jié)晶,,而泵運(yùn)動(dòng)時(shí)鹽結(jié)晶會(huì)導(dǎo)致密封圈和柱塞桿的磨損。因此,,每天實(shí)驗(yàn)前和實(shí)驗(yàn)后都需用純水沖洗一次密封圈(在柱塞密封圈和二級密封圈之間),,保持清洗管內(nèi)有水以防止形成晶體,延長柱塞桿和密封圈的使用壽命,。

                         等度系統(tǒng)                                            梯度系統(tǒng)

                                         

                                              柱塞桿清洗連接示意圖

 

  

       4,、在線過濾器。為了防止由于流動(dòng)相雜質(zhì)微粒進(jìn)入色譜系統(tǒng),,泵在放空閥內(nèi)安裝了在線過濾器,,經(jīng)泵出口流出的液體通過在線過濾器,經(jīng)排空管流出的液體不通過在線過濾器,。儀器使用一定時(shí)間后,,建議用戶清洗在線過濾器的燒結(jié)不銹鋼過濾片。用扳手卸下壓帽,,將密封環(huán)和燒結(jié)不銹鋼過濾片一同取出清洗,,清洗后按原位裝上。清洗溶劑可以選擇30%稀硝酸溶液,,正相系統(tǒng)需注意濾頭的烘干處理,。

 

             在線過濾裝置示意圖

 

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