色譜柱常見操作維護(hù)
一,、正確使用緩沖鹽  
緩沖鹽通常易溶于水,，難溶于有機(jī)溶劑，因此緩沖鹽使用不當(dāng)會(huì)使其析出,，堵塞填料基質(zhì)上的微孔和顆粒間的空隙,，使填料板結(jié)，柱壓上升,；同時(shí)阻礙了基質(zhì)上鍵合的碳鏈自由舒展,，使色譜柱的保留能力下降,，柱效降低。緩沖鹽析出后,，去除非常困難,，因此，正確的使用緩沖鹽對(duì)延長(zhǎng)色譜柱使用壽命非常重要,。
正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出,，因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結(jié)為一句話：使用前要過(guò)濾，使用后要沖洗,。具體方法如下：
1,、等度條件：使用緩沖鹽前和使用后需用過(guò)渡流動(dòng)相以1.0ml/min流速?zèng)_洗60min；使用后去除緩沖鹽的另一個(gè)方法是用過(guò)渡流動(dòng)相以0.2ml/min流速?zèng)_洗色譜柱,。
2,、梯度條件：用含有緩沖鹽的流動(dòng)相跑梯度之前，用與初始流動(dòng)相組成相同的過(guò)渡流動(dòng)相以1.0ml/min流速?zèng)_洗60min,，再用該過(guò)渡流動(dòng)相以1.0ml/min沖洗色譜柱120min。含緩沖鹽流動(dòng)相的梯度設(shè)定應(yīng)盡量平緩,，以避免梯度過(guò)程中緩沖鹽析出,。
注意：過(guò)渡流動(dòng)相是指有機(jī)相和水相的組成與分析流動(dòng)相相同，區(qū)別只是過(guò)渡流動(dòng)相不含緩沖鹽,。
3,、緩沖鹽析出的補(bǔ)救方法：
1）方案1：用甲醇/20/80以1.0ml/min流速35攝氏度條件下反向沖洗色譜柱120min
2）方案2：用甲醇/水=20/80以0.2ml/min流速反向沖洗色譜柱。

二,、防止強(qiáng)保留物質(zhì)在色譜柱上存留
強(qiáng)保留物質(zhì)和大分子化合物在色譜柱中累積,，對(duì)樣品中的化合物產(chǎn)生額外的保留行為，不僅引起峰型變寬,、拖尾,，使柱效下降，同時(shí)也會(huì)引起保留時(shí)間的變化,，累積到一定程度時(shí)還會(huì)導(dǎo)致柱壓升高,。由于強(qiáng)保留物質(zhì)和大分子化合物對(duì)色譜分離的影響是一個(gè)累積效應(yīng)，需要一定的時(shí)間才會(huì)體現(xiàn)出來(lái),，但對(duì)許多藥品特別是復(fù)雜樣品而言,，很難判斷其是否是含有強(qiáng)保留物質(zhì)，因此要防止強(qiáng)保留物質(zhì)的累積,，需要在每天的日常維護(hù)中用純甲醇或乙氰清洗色譜柱,。 clin-lab.com
清洗方法：
1、未使用緩沖鹽：每天分析完成后,，先用上述方法除去緩沖鹽,，然后再用甲醇或乙氰反向沖洗色譜柱60min,。
2、使用過(guò)緩沖鹽：分析完成后,，先用上述方法除去緩沖鹽,，然后在用純甲醇或乙氰反向沖洗色譜柱60min
3、補(bǔ)救方法：
水——乙氰——氯仿（或異丙醇）——乙氰——水
每一步以1.0ml/min流速反向沖洗色譜柱60min,。