1,、 色譜柱的使用說明：

        （1）、色譜柱使用前注意事項：色譜柱的儲存液無特殊說明,，均為評價報告所示的流動相,。在使用前,，一定要注意色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中,，如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑,，應(yīng)先用10％左右的低濃度的有機(jī)相洗脫劑過渡一下，否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機(jī)相中很容易析出,，堵塞色譜柱,。

         （2）、流動相：流動相中所使用的各種有機(jī)溶劑要盡可能使用色譜純,，配流動相的水是超純水或全玻璃器皿的雙蒸水,。如果將所配得流動相再經(jīng)過0.45μm的濾膜過濾一次則更好，尤其是含鹽的流動相,。另外,，裝流動相的容器和色譜系統(tǒng)中的在線過濾器等裝置應(yīng)該定期清洗或更換。以常規(guī)硅膠為基質(zhì)的鍵合相填料通常的PH值適用范圍是2.0-8.0,，BDS C18適合于堿性化合物,，PH值適用范圍為2.0-10.0。當(dāng)必須要在PH值適用范圍的邊界條件下使用色譜柱時,，每次使用結(jié)束后立即用適合于色譜柱儲存并與所使用的流動相互溶的溶劑清洗,，并*置換掉原來所使用的流動相。  

        （3）,、樣品：樣品也要盡可能清潔,，可選用樣品過濾器或樣品預(yù)處理柱（SPE）對樣品進(jìn)行預(yù)處理；若樣品不便處理,，要使用保護(hù)柱,。在用正相色譜法分析樣品時，所有的溶劑和樣品應(yīng)嚴(yán)格脫水,。

         2,、 色譜柱的保存

        （1）、反相色譜柱每天實驗后的保養(yǎng)：使用緩沖液或含鹽的流動相,，實驗完成后應(yīng)用10%的甲醇/水沖洗30分鐘,，洗掉色譜柱中的鹽，再用甲醇沖洗30分鐘,。注意：不能用純水沖洗柱子,，應(yīng)該在水中加入10%的甲醇，防止將填料沖塌陷,。

       （2）、長期保存色譜柱：如色譜柱要長時間保存,，必須存于合適的溶劑下,。對于反相柱可以儲存于純甲醇或乙腈中,，正相柱可以儲存于嚴(yán)格脫水后的純正己烷中，離子交換柱可以儲存于水（含防腐劑疊dan化鈉 ）中,，并將購買新色譜柱時附送的堵頭堵上,。儲存的溫度是室溫。

         3,、 色譜柱的再生因為色譜柱是消耗品,，隨著使用時間或進(jìn)樣次數(shù)的增加，會出現(xiàn)色譜峰高降低,，峰寬加大或出現(xiàn)肩峰的現(xiàn)象,，一般來說可能是柱效下降。

       （1）,、反相柱的再生：依次采用20-30倍的色譜柱體積的甲醇：水=10：90 （V/V）,，乙腈，異丙醇作為流動相沖洗色譜柱,，完成后再以相反順序沖洗色譜柱,。

       （2）、正相柱的再生：依次以20-30倍色譜柱的體積的正己烷,、異丙醇,、二氯甲烷、甲醇作為流動相沖洗色譜柱,，然后再以相反的順序沖洗色譜柱,。要注意上述溶劑必須嚴(yán)格脫水。

          4,、 色譜柱在使用過程中易出現(xiàn)的問題和解決辦法

         色譜柱在使用中zui常見的問題就是柱壓升高,，如果柱壓是在長時間使用過程中緩慢增加，屬于正?，F(xiàn)象,。但柱壓在使用過程中突然升高（系統(tǒng)管路堵塞及壓力傳感器故障除外），可能的原因有如下幾點：

        （1）,、色譜柱頭的過濾篩板堵塞或污染,；

        （2）、色譜柱頭的填料被樣品污染,；

        （3）,、色譜柱內(nèi)緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機(jī)溶劑，形成結(jié)晶析出,；

        （4）,、流動相PH值過大或過小使固定相結(jié)構(gòu)破壞或溶解。

          解決辦法如下：

          （1）,、如確定是色譜柱頭的過濾篩板被污染,，可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力,，或者卸下色譜柱頭，將其放在10％的稀硝酸內(nèi)超聲清洗10分鐘,，后再用純水超聲10分鐘,，重新裝入色譜柱。

          （2）,、如確定色譜柱頭的填料被污染,，將柱頭螺絲卸下，挖出柱內(nèi)前段被污染的填料,，用相同的柱填料重新填入,，仔細(xì)修復(fù)后，重新安裝上柱頭螺絲,。

         （3）,、如確定定是鹽結(jié)晶，用10%的甲醇/水沖洗色譜柱使柱內(nèi)鹽全部溶解,，再換高濃度甲醇,。

         （4）、如果因PH值使用不當(dāng),，很難恢復(fù),。