注射進(jìn)樣量/注射進(jìn)樣體積

    樣品質(zhì)量或體積過(guò)載和使用錯(cuò)誤的樣品溶劑都會(huì)造成色譜柱性能的顯著降低,，由此損害分離效果,。注射進(jìn)樣體積不得超過(guò)流速的10%（比如，在流速為1毫升/分鐘時(shí),，注射進(jìn)樣體積<100微升）,。樣品進(jìn)樣量高出吸附等溫線的線性部分就意味著上樣量過(guò)載。這條分界線不一而足,，原則上,，每毫升柱體積上不得承載超過(guò)0.01毫克的樣品（比如，在4.6 X 250 毫米色譜柱上zui大上樣量為22微克）,。如果因?yàn)闄z測(cè)精度需要,，上樣量還是可以再上調(diào)。樣品溶劑內(nèi)的強(qiáng)移動(dòng)相組分（反相模式下脂肪醇,、乙腈,，或者正相模式下脂肪醇,、乙酸乙酯等）含量不得超過(guò)它們?cè)诠ぷ饕苿?dòng)相中的濃度。

額外柱體積/死體積

    塔板數(shù)低下的原因通常是因?yàn)樗荔w積過(guò)大,。死體積是一下這些部分工作體積的總和,，樣品注射器,，包括樣品環(huán),，連接注射器和色譜柱的導(dǎo)管，連接色譜柱和貫流分析池的導(dǎo)管,，貫流分析池,，再加上配件、接頭和線程內(nèi)濾膜所產(chǎn)生的空間,。內(nèi)徑為0.010”的導(dǎo)管在液相色譜系統(tǒng)中zui常見(jiàn),。如果使用鉆孔更細(xì)（內(nèi)徑<3.0毫米）的色譜柱，可以將內(nèi)徑為0.010”的導(dǎo)管更換成內(nèi)徑為0.007”的導(dǎo)管以減少死體積,，從而提高色譜性能,。使用內(nèi)徑為0.005”的導(dǎo)管可以進(jìn)一步減少死體積，但就是操作上不太方便,。使用內(nèi)徑小于0.007”的導(dǎo)管對(duì)流速有所限制,，當(dāng)緩沖鹽分沉淀析出時(shí)會(huì)帶來(lái)麻煩。如果您正使用多種品牌的液相色譜柱,，請(qǐng)確認(rèn)用以連接色譜柱的配件是否剛好配套,。如果您的色譜系統(tǒng)使用的是不銹鋼導(dǎo)管和配件，在連接色譜柱前,，請(qǐng)?jiān)诤藢?duì)色譜柱的品牌后選擇正確的配件并預(yù)先裝配好,。如果您的色譜系統(tǒng)使用的是聚醚醚酮材料的導(dǎo)管和配件，比較理想的方式是在每次更換色譜柱的時(shí)候,，選擇在新切下的聚醚醚酮導(dǎo)管上安裝全新的聚醚醚酮配件,，以確保它們之間匹配。