液相色譜柱是指利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,,對混合物進(jìn)行先分離,,而后分析鑒定的儀器。液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體,,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)?,F(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng),、溫度控制系統(tǒng),、色譜柱、檢測器,、信號(hào)記錄系統(tǒng)等部分組成,。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較,具有,、快速,、靈敏等特點(diǎn)。
液相色譜柱對高沸點(diǎn),、難氣化合物的混合物通過色譜柱核淋洗劑并以實(shí)現(xiàn)分離,。應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境化學(xué),、石油化工等部門,。
在選擇液相色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質(zhì),,他們的類型結(jié)構(gòu),、極性、酸堿性,、分子量大小等等,,
1、樣品是極性的且弱酸性的,;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測,,即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱
2、如果樣品極性太強(qiáng),,或酸性太強(qiáng),;可以選擇CN,NH2,,或硅膠柱,液相色譜柱(親水色譜),,也有使用C18+強(qiáng)陰離子對試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱(缺點(diǎn)是離子對試劑平衡時(shí)間長,,對流動(dòng)相pH要求比較精密,,否 則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn),另外離子對試劑很難洗下來,,基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實(shí)驗(yàn))
3,、若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì),,且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等),,他們都會(huì)減少堿性化合物的拖尾,一般會(huì)選擇中性或偏堿的條件下做,,因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留
4,、如果堿性化合物的極性太強(qiáng),或堿性太強(qiáng),;液相色譜柱可以選擇寬pH的C18液相色譜柱在高pH值檢測(優(yōu)點(diǎn)是方法開發(fā)簡單,,缺點(diǎn)是目前實(shí) 現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少,價(jià)格也高)或者選用液相色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用,,這也是很經(jīng)典的檢測堿性樣品的方法)選擇強(qiáng)離子交換柱也有使用C18+強(qiáng)陰離子對試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱,。