凝膠成像儀是一款用于電泳結(jié)束后對(duì)凝膠譜帶的觀察,、拍攝和分析的儀器,。主要用于蛋白質(zhì)、核酸凝膠成像及分析,,系統(tǒng)提供白光和紫外光以及藍(lán)光光源進(jìn)行拍攝凝膠,,由系統(tǒng)自帶的圖像捕捉軟件捕捉拍攝圖像,然后由系統(tǒng)自帶的圖像分析軟件對(duì)拍攝的圖像進(jìn)行分析,。
使用凝膠成像儀時(shí),需要按正確的步驟來操作,,避免因不恰當(dāng)操作而造成的儀器損壞,。操作步驟如下:
在初次使用,都是按正常的流程打開凝膠成像儀電源開關(guān),,打開電腦,,并進(jìn)入成像軟件。根據(jù)自己的實(shí)際需求,,選擇雙擊桌面的圖表軟件,,按流程操作。
1,、ECL拍攝
將拍攝模式切換為“ECL模式”,,將濾光輪轉(zhuǎn)到ECL位。選擇合適拍攝分辨率(有像素合并功能的機(jī)器都有這個(gè)功能),,點(diǎn)擊“啟動(dòng)”,。將樣品放置在樣品臺(tái)正中間,調(diào)整鏡頭的焦距使樣品占據(jù)窗口約80%左右,,然后點(diǎn)擊“自動(dòng)曝光”,,勾掉“負(fù)片”并調(diào)整聚焦使預(yù)覽窗口中的樣品圖像清晰.(光圈越大,自動(dòng)曝光所需時(shí)間越短,。)并先用單幀拍攝,,拍攝一張Mark照片。關(guān)閉反射白光后給放置在化學(xué)發(fā)光成像板上的纖維素膜均勻加上發(fā)光液,。將拍攝方式設(shè)置為“規(guī)則積分”,,勾上“負(fù)片”,并設(shè)置的時(shí)間和張數(shù),,點(diǎn)擊“拍攝”按鈕即可,。
2、普通凝膠拍攝
(1)將拍攝模式切換為“普通模式”,,凝膠成像儀,,將濾光輪轉(zhuǎn)到UV位(無綠光鏡輪的無需調(diào)整)。
(2)選擇合適拍攝分辨率(機(jī)器有像素合并功能),,點(diǎn)擊“啟動(dòng)”,。
(3)DNA膠拍攝:將DNA膠放置在紫外臺(tái)正中間,,調(diào)整焦距使樣品占據(jù)窗口約80%左右,然后點(diǎn)擊“自動(dòng)曝光”,,并調(diào)整聚焦使預(yù)覽窗口中的樣品圖像清晰.然后關(guān)閉反射白光,,開啟透射紫外,并微調(diào),,確保在紫外下處于清晰狀態(tài),。
(4)蛋白質(zhì)膠拍攝:將蛋白質(zhì)膠放在拆疊白光板的中間,關(guān)閉反射白光,,開啟透射白光,,然后點(diǎn)擊“自動(dòng)曝光”,并調(diào)整聚焦使預(yù)覽窗口中的樣品圖像清晰,。
(5)在軟件界面點(diǎn)擊“拍攝”按鈕即可,。