在選擇凝膠成像系統(tǒng)時,我們關(guān)注的問題通常有以下一些方面:
1、為什么需要制冷CCD,它適用于哪些情況?在曝光超過5-10秒時,CCD芯片就會發(fā)熱,,沒有致冷設(shè)備的芯片,“熱”或者白的像素點就會遮蓋圖像,,圖像到處可見雪花,。在相同滿井電子的CCD情況下,降低CCD噪音,,就能提高CCD的監(jiān)測能力,,熱或者暗電流對于CCD都是噪音,噪音在制冷 CCD中基本都可以被深度致冷的Peltier消除,。 CCD結(jié)構(gòu)設(shè)計,、數(shù)字化的方法等都會影響噪音的產(chǎn)生。當然通過改善結(jié)構(gòu),、優(yōu)化方法,,同樣能減少噪音的產(chǎn)生。制冷CCD的適用性:熒光及化學(xué)發(fā)光本身較弱,,所以對CCD噪音的降低要求很高,,應(yīng)選用高分辨率數(shù)字冷卻CCD相機結(jié)合高通透鏡頭系統(tǒng),使其能夠捕獲到信號極其微弱的熒光及化學(xué)發(fā)光樣品圖像,,并且能夠zui大程度的降低噪音,,減少背景,提供出色的圖像清晰度,。另外可選激發(fā)光源及多位濾鏡輪擴大了熒光/化學(xué)發(fā)光成像的應(yīng)用范圍,。所以一般在熒光及化學(xué)發(fā)光觀察時需要選擇制冷CCD。所以制冷CCD相機是分子影像成像分析系統(tǒng)的未來的發(fā)展趨勢和必須要求,。
2,、什么是信噪比和暗電流,它與CCD有什么關(guān)系?提到制冷CCD ,我們就必須提到另外一個參數(shù)就是信噪比, 圖象的信噪比應(yīng)該等于信號與噪聲的功率譜之比;說到信噪比就不得不提到暗電流了,,因為暗電流是導(dǎo)致CCD噪音的很重要的因素,。暗電流指在沒有曝光的情況下,在一定的時間內(nèi),,CCD傳感器中像素產(chǎn)生的電荷,。我們在做化學(xué)發(fā)光檢測的時候,需要的曝光的時候比較長,,這樣導(dǎo)致CCD產(chǎn)生較多的暗電流,對圖像的質(zhì)量影響非常大,。通常情況下,,通過降低CCD的溫度來zui大限度的減少暗電流對成像的影響,。CCD產(chǎn)生的暗電流隨著溫度下降而減少,但是在-23℃下曲線開始趨于平緩,,由此可以看出溫度并非需要無休止的降低的,。所以在選擇冷CCD時,溫度在-25℃(溫度,,非室溫以下)下一般就可以達到您的要求了,。有的CCD是在圖像zui終生成后,通過軟件去背景來扣除暗電流,,對于信號遠遠強于背景的有一定效果,,但是對于弱信號處理過程中會產(chǎn)生越來越多的錯誤。
3,、什么是量子效率? CCD的量子效率也稱像素靈敏度,,指在一定的曝光量下,像素勢阱中所積累的電荷數(shù)與入射到像素表面上的光子數(shù)之比。不同結(jié)構(gòu)的CCD其量子效率差異很大,。值得注意的是CCD 的量子效率與入射光的波長有關(guān),。動態(tài)范圍的值越高CCD性能越好.
4、如何選擇光學(xué)鏡頭?光學(xué)鏡頭是機器視覺系統(tǒng)中*的部件,,直接影響成像質(zhì)量的優(yōu)劣,,影響算法的實現(xiàn)和效果。光學(xué)鏡頭規(guī)格繁多,,有時不免頭暈,。光學(xué)鏡頭從焦距上可分為短焦鏡頭、中焦鏡頭,,長焦鏡頭;從視場大小分有廣角,、標準,遠攝鏡頭;結(jié)構(gòu)上分有固定光圈定焦鏡頭,,手動光圈定焦鏡頭,,自動光圈定焦鏡頭,手動變焦鏡頭,、自動變焦鏡頭,,自動光圈電動變焦鏡頭,電動三可變(光圈,、焦距,、聚焦均可變)鏡頭等。
5,、常用的數(shù)據(jù)傳輸?shù)姆绞绞鞘裁? IEEE1394總線是一種目前為止zui快的高速串行總線,,火線(IEEE1394)支持的傳輸速率有100Mbps,200Mbps,400Mbps,,zui高的傳輸速度為400Mbps/s,。對于各種需要大量帶寬的設(shè)備提供了專門的優(yōu)化,,接口可以同時連接63個不同設(shè)備,IEEE1394同USB一樣,,支持帶電插撥設(shè)備,。IEEE1394同樣支持即插即用,現(xiàn)在的WIN98 SE,、WIN2000,、WIN ME、WIN XP都對IEEE1394支持的很好,,在這些操作系統(tǒng)中用戶不用再安裝驅(qū)動程序,,也能使用IEEE1394設(shè)備。1.軟件功能包括哪幾個方面?選擇好成像系統(tǒng)后,,配套的軟件選擇也很重要,。硬件設(shè)備再好,如果不配上好的軟件,,也無法發(fā)揮它應(yīng)有的功能,。作為凝膠成像系統(tǒng)軟件功能和用途都基本相似,這里我們介紹一下zui關(guān)注的幾個特點: A,、軟件的基本功能:可對不同樣品,,如條帶,斑點,,細菌克隆,,芯片,細胞或者活體動物等,,進行定性,、定量分析,加批注,,輸出圖像等操作,。 B、圖像采集方式:對于化學(xué)發(fā)光或多色熒光產(chǎn)品,,軟件應(yīng)具備電影模式,,可以進行圖像多禎累計功能來增強線性動態(tài)范圍和數(shù)據(jù)準確度。 C,、操作簡便,,軟件應(yīng)具備操作輔助工具,使軟件操作更簡單易用,。采用三步式泳道及條帶分析,,可以快速計算蛋白質(zhì)和核酸的分子量及含量。 D,、數(shù)據(jù)庫功能也是*的,,這樣可以檢索,、分類或比較所有生成的圖像??衫貌煌娘@示算法程序圖像化顯示條帶差異。 E,、曝光方式:應(yīng)采用單一曝光,、多重曝光,累計曝光,,延時(定時)曝光多種模式可選,。 F、記憶功能:軟件能記憶并自動調(diào)用成像數(shù)據(jù),,這樣你不用每次設(shè)置就能獲得重復(fù)性好的結(jié)果,。 G、軟件應(yīng)配備兩套以上,,使用單機版,,多用戶版或網(wǎng)絡(luò)版,用戶可彼此獨立操作,,互不干擾,,互不混淆。
6,、為何要采用自動變焦鏡頭,,有何意義?自動變焦鏡頭無需手動調(diào)節(jié),可操作性強,,同時也減少了EB潛在的污染機會,。再者使得將CCD內(nèi)置成為了可能,從而達到防灰防塵防震的目的,,更好地保護了核心部件延長產(chǎn)品的使用壽命,。
7、紫外對人體有傷害,,是否具有防護措施?紫外對人體,,特別是眼睛有一定傷害,TOCAN凝膠成像系統(tǒng)具備紫外防護設(shè)施,,在紫外燈開啟的狀態(tài)下,,如不慎打開暗箱,紫外燈會自動熄滅防止對人體的傷害,。
8,、能否在凝膠成像上直接切膠? TOCAN凝膠成像可以,如需直接切膠,,首先按系統(tǒng)中間的觀察窗,,打開裝有進口防紫外玻璃的觀察窗口,,然后打開左右兩側(cè)專為割膠所設(shè)計的小門,即可進行切膠操作,。
9,、如何調(diào)節(jié)焦距,聚焦,光圈以獲得高質(zhì)量的圖片?三個zui重要的可調(diào)參數(shù)分別是焦距,聚焦和光圈,。其中焦距調(diào)節(jié)清晰度,,聚焦調(diào)節(jié)圖像大小,光圈調(diào)節(jié)明暗,。一般先把光圈調(diào)節(jié)到適宜的亮度后,,再調(diào)節(jié)聚焦將圖像放到zui大,zui后調(diào)解焦距,,在圖像較大的情況下焦距比較容易調(diào)節(jié)到zui清晰狀態(tài),,然后再把圖像縮放在適宜大小后成像即可。