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中級(jí)會(huì)員 | 第12年

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改良油紅O染色液

時(shí)間:2017-3-1閱讀:1355
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

     脂質(zhì)(Lipid)是中性脂肪,、類脂及其衍生物的總稱,,其共同的物理特性是不溶于水,易溶于有機(jī)溶劑(如乙醇,、等),。人體的脂肪主要有兩種:1、儲(chǔ)存脂肪,,如中性脂肪,,主要分布于皮下、腎,、胰腺等部位,。2、結(jié)構(gòu)脂肪,,如類脂(磷脂,、糖脂、膽固醇等),,主要分布于細(xì)胞內(nèi),。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油組成的脂類,呈中性,。中性脂肪是儲(chǔ)存能量的方式之一,,在氧化時(shí)釋放出能量。中性脂肪染色經(jīng)常采用蘇丹Ⅱ,、蘇丹Ⅲ,、蘇丹Ⅳ、蘇丹,、油紅O法等,。傳統(tǒng)方法采用蘇丹染料,zui近發(fā)現(xiàn)偶氮染料油紅O更適合脂肪的染色,。油紅O是很強(qiáng)的脂溶劑和染脂劑,,較易與甘油三脂結(jié)合呈小脂滴狀,

與磷脂結(jié)合力稍差,。其染色原理一般認(rèn)為是物理上的溶液作用或吸附作用,,借溶液作用使脂肪染色。染料在冰凍切片內(nèi)脂質(zhì)的溶解度較原溶劑中的溶解度更大,,所以在染色時(shí)染料就從有機(jī)溶劑轉(zhuǎn)移入脂質(zhì)而使脂肪染色,。

     改良油紅O染色液主要用于顯示組織器官的脂肪變性和類脂質(zhì)的異常沉著,,常發(fā)生于肝、腎,、心等實(shí)質(zhì)臟器的脂肪變性,,細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)多數(shù)中性脂肪滴;鑒別和診斷脂肪組織中所發(fā)生的腫瘤及其性質(zhì),。標(biāo)本不采用含有乙醇的固定液(如需要固定可采用10%福爾馬林),,樣本不采用石蠟切片,需用冰凍切片或碳蠟切片,,脂肪的陽性染色結(jié)果呈橘黃至紅色,,但具體顏色因脂質(zhì)濃度而定。

產(chǎn)品組成:

產(chǎn)品

  規(guī)格

 

2×50ml

2×100ml

儲(chǔ)存

試劑(A):改良

Oil Red O Stain

A1: Oil Red O Stain A

30ml

60ml

4℃,避光

A2: Oil Red O Stain B  

20ml

40ml

4℃

充分搖勻A1、A2后,按A1,、A2=3:2比例混合靜置10min, 即為改良Oil Red O Stain,不宜提前配制,;如有條件盡量進(jìn)行過濾,以免色素沉淀,,造成假陽性,。

試劑(B): Mayer 蘇木素染色液

50ml

100ml

4℃,避光

使用說明書

               1份

自備材料:

1、60%異丙醇

2,、蒸餾水

3,、1%鹽酸溶液

  1. 甘油明膠或阿拉伯糖膠

操作步驟(僅供參考):

1、冰凍切片厚度6~10μm,,不固定或10%福爾馬林固定10min后水洗,。

2、入蒸餾水中稍沖洗,。

3,、 入60%異丙醇浸洗20~30s。

4,、 入改良油紅O染色液(加蓋),,密閉染色10~15min。

5,、 分色: 入60%異丙醇稍洗以便去除染液,。

6、 入蒸餾水稍微清洗,。

7,、 入 Mayer 蘇木素染色液,復(fù)染核1~2min,。

8,、 (可選)1%鹽酸溶液稍微分化一下,。

9、 (可選)自來水漂洗10min或稀碳酸鋰溶液促藍(lán),。

10,、 入蒸餾水稍微清洗。

11,、 用濾紙吸干周圍水分,。甘油明膠或阿拉伯糖膠封固,。

染色結(jié)果:

中性脂肪

橙紅色或者橘紅色

細(xì)胞核

藍(lán)色

注意事項(xiàng):

1,、改良油紅O染色液不夠穩(wěn)定,易產(chǎn)生沉淀,,不宜提前配制,。

2、如果60%的異丙醇不易獲得,,亦可采用70%的乙醇,。

3、由于脂肪易溶于有機(jī)溶劑,,所以顯示脂肪一般不能像石蠟切片一樣處理,,而通過冰凍切片染色來顯示。

4,、作脂肪染色的冰凍切片不可太薄,,過薄的切片常會(huì)使脂質(zhì)丟失。

5,、Mayer蘇木素染色液復(fù)染時(shí)間不能過長(zhǎng),。

6、染色結(jié)果不能長(zhǎng)期保存,,應(yīng)盡快觀察及照相,。

7、甘油明膠封固的樣本,,保存時(shí)間不長(zhǎng),。如需長(zhǎng)期保存,可以在蓋玻片與載玻片交界的邊緣用中性樹膠封閉,。

有效期:12個(gè)月有效,。

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