果實(shí)中有機(jī)酸的測定-HPLC法

    果實(shí)中的有機(jī)酸有草酸,、乙酸,、蘋果酸、檸檬酸,、琥珀酸、乳酸等,。乳癰常規(guī)的酸堿滴定法,，雖然可測出總算量，但對各成分酸的含量則無法確定,，若采用液相色譜法（HPLC）則可解決此難題,。

     液相蘇測有機(jī)酸是利用有機(jī)酸在化學(xué)合C18固定相與2%NH4H2PO4的流動相分配系數(shù)之間的差異而進(jìn)行分離后，再經(jīng)紫外檢測器或示差吸光檢測器而檢出,，定性可根據(jù)色譜曲線的保留時間,，定量可根據(jù)色譜峰面積或峰高,，利用外標(biāo)法計(jì)算而得。

試劑和儀器 夜宵液相色譜儀,，告訴離心機(jī),，0.45nm唯恐過濾膜，10ml進(jìn)樣器,。NH4H2PO4496%乙醇,，0.01mol/NaOH及200ppm標(biāo)準(zhǔn)有機(jī)酸.

試驗(yàn)步驟

1、樣品的處理 5-10g樣品用80%乙醇25ml于75℃水浴中提取15min,，冷后離心,，收集煽情也，沉淀10ml80%乙醇洗兩次,，江上清液收集在一起,，zui后用80%乙醇定容至50ml取5ml蒸發(fā)至干（在75℃下），殘?jiān)?ml流動相溶解,。共色譜測定用,。

2、標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制  取200ppm的原液0.5,、1,、2、3,、4ml,，用流動相稀釋至5ml混勻后共色譜測定用。

3,、色譜測定

固定相：化學(xué)鍵合C18

流動相：2.5%NH4H2PO6(PH=2.8)

流速：1ml/min

進(jìn)樣量10ul

檢測器：紫外檢測器（214nm）,，0.1AUFS

以峰高或峰面積做標(biāo)準(zhǔn)曲線，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查找出有機(jī)酸濃度求算出有機(jī)酸含量,。