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當(dāng)前位置:青島捷世康生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>姬姆薩染色液(Giemsa Stain,1:9)說明書
產(chǎn)品簡介:
姬姆薩色素(又稱吉姆薩色素)是由天青Ⅱ與伊紅混合而成。Giemsa 染色原理和結(jié)果與瑞氏染色基本相同,,姬姆薩染色液對胞漿著色力較強,,能較好的顯示胞漿的嗜堿性程度,特別是對血液和骨髓細(xì)胞中的嗜天青,、嗜酸性,、嗜堿性顆粒,著色清晰,,但是對胞核著色偏深, 核結(jié)構(gòu)顯色不佳,,故姬姆薩染液常與瑞氏染液聯(lián)合使用。Giemsa Stain 以進(jìn)口的姬姆薩色素,、甲醇為主要原料,,含有襯染劑,經(jīng)研磨配制而成,,能呈現(xiàn)出清晰的細(xì)胞染色效果,,經(jīng)常用于組織切片、血液和細(xì)胞涂片,、細(xì)菌,、染色體顯帶、原生動物寄生蟲等染色,。嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì),,與酸性染料伊紅結(jié)合,染粉紅色,,稱為嗜酸性物質(zhì),;細(xì)胞核蛋白和淋巴細(xì)胞胞漿為酸性,與堿性染料美藍(lán)或天青結(jié)合,,染紫藍(lán)色,,稱為嗜堿性物質(zhì);中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍(lán)均可結(jié)合,,染淡紫色,,稱為中性物質(zhì),。
自備材料:
1、 載玻片,、顯微鏡
2,、 蒸餾水,、甲醇,、0.1~0.5%乙酸
操作步驟(僅供參考):
(一)一步法涂片染色
1、Giemsa 工作液的配制:按試劑(A):試劑(B)=1:9 混合,,即取1份 Giemsa Stain 儲存液(10×)加入到9份的磷酸鹽緩沖液中充分混勻,,即為Giemsa 工作液,為即用型試劑,, 不易保存,,即用即配。
2,、常規(guī)方法制備血液涂片或骨髓涂片,,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1~3min,。
3,、將血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加Giemsa工作液覆蓋涂片,,室溫滴染15~
30min,。
4、用自來水或蒸餾水緩慢從玻片一端沖洗,。干燥,、鏡檢。
(二)兩步法涂片染色
1,、Giemsa 工作液的配制:按試劑(A):蒸餾水=1:4 混合,,即取1份的 Giemsa Stain儲存液(10×)加入到4份的蒸餾水中充分混勻,即為 Giemsa 工作液,;Giemsa 工作液為即用型試劑,,不易保存,即用即配,。
2,、常規(guī)方法制備血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,,用甲醇固定1~3min,。
3、將血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,,滴加適量Giemsa 工作液覆蓋涂片,,室溫滴染10~15min,。
4、加入等量磷酸鹽緩沖液,,輕輕晃動載玻片,,室溫靜置 5~10min。
5,、用自來水或蒸餾水緩慢從玻片一端沖洗,。干燥、鏡檢,。
(三)組織切片染色
1,、Giemsa 工作液的配制:按試劑(A):試劑(B) =1:9 混合,即取1份Giemsa Stain 儲存液(10×)加入到9份磷酸鹽緩沖液中充分混勻,,即為Giemsa工作液,;Giemsa工作液為即用型試劑,不易保存,,即用即配,。
2、新鮮組織立即置于Regaud 固定液固定2天,,期間應(yīng)更換1次固定液,。
3、3%重鉻酸鉀固定1天,。
4,、流水沖洗16個小時或過夜。
5,、常規(guī)脫水,、包埋。
6,、切片厚度約為5μm,,常規(guī)脫蠟至水。
7,、蒸餾水清洗2次,,每次1min。
8,、入含Giemsa工作液染缸浸染 18~24h,,蒸餾水稍微清洗。
9,、0.1~0.5%乙酸洗 1~2min,,自來水稍洗。
有效期:24個月有效,。
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