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當(dāng)前位置:青島捷世康生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>TMB底物顯色試劑盒(ELISA,HRP顯色)產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)是非常優(yōu)秀的酶免試驗(yàn)顯色劑,,能溶解于多種有機(jī)溶劑和雙蒸水中,,為穩(wěn)定的無色溶液,與適量過氧化脲或雙氧水與緩沖液混勻后與過氧化物酶作用產(chǎn)生清晰的藍(lán)色產(chǎn)物,,極易觀察,。由于其靈敏度高,配制后的工作液穩(wěn)定,,加上無致癌特性,,被廣泛用于酶聯(lián)免疫(ELISA)試驗(yàn)和尿試紙的檢測(cè)反應(yīng)等,TMB主要應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA),,經(jīng)典的方法是采用A,、B液分開配制,使用前再混合的方法,,并且長(zhǎng)期存放穩(wěn)定,,本試劑一般情況下為無色,有時(shí)略顯淺藍(lán)色或淺黃色,。
TMB底物顯色試劑盒(ELISA,HRP顯色)主要由TMB顯色液,、TMBBuffer、TMB氧化劑組成,,其特點(diǎn)是:1,、靈敏度高;2,、穩(wěn)定性好,,顯色終止后讀數(shù)穩(wěn)定;3,、背景低:底物溶液在450nm檢測(cè)時(shí)OD值一般小于0.05。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,,不宜用于臨床診斷或其他用途,。
自備材料:
1、酶標(biāo)儀,、酶標(biāo)板或 96 孔板,、恒溫箱(備選)
2,、(備選)終止液:鹽酸或硫酸等
操作步驟(僅供參考):
1、用適當(dāng)?shù)母蓛羧萜?/span>(用純凈水反復(fù)沖洗),,取試劑(A),、(B)、(C),,按 A:B:C= 5000:5000:4的比例混合,,即為 TMB 顯色工作液,待達(dá)到室溫后即可使用,。
2,、加液:加完 HRP 結(jié)合物并溫育一定時(shí)間,洗板 3~5 次,,每孔加 TMB 顯色工作液 100 μl,,在室溫(15~25℃)或 37℃下溫育 10~30 分鐘。
3,、(選做)終止:加等體積的1M 鹽酸或硫酸溶液終止反應(yīng),,孔中反應(yīng)液由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
4,、讀數(shù):30min內(nèi)在 450nm處讀數(shù),。
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒給予的TMB氧化劑多于實(shí)際使用量,,請(qǐng)按比例使用,。
2、TMB 氧化劑易揮發(fā),,請(qǐng)注意密閉保存,,以免效率下降,一旦開封請(qǐng)盡快使用,。
3,、TMB 氧化劑有腐蝕性,請(qǐng)勿直接接觸于人皮膚,、毛發(fā)等,。
4、如果出現(xiàn)高的反應(yīng)背景或沉淀,,表明 TMB 底物反應(yīng)過于強(qiáng)烈,。
5、終止反應(yīng)不是必須步驟,,如不加終止液應(yīng)顯色完成后立即檢測(cè),。
6、一般市售的濃鹽酸為11.6M,,濃硫酸為18.3M,,但應(yīng)注意其揮發(fā)性,。
7、為了避免產(chǎn)生沉淀,,可在終止后馬上讀數(shù),,或者進(jìn)一步稀釋一抗和/或 HRP結(jié)合物,再次進(jìn)行試驗(yàn),。
8,、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。
有效期:12個(gè)月內(nèi)有效,;4℃運(yùn)輸,4℃保存,。
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