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當(dāng)前位置:青島捷世康生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>高鐵血紅蛋白還原檢測(cè)試劑盒(比色法)說(shuō)明書(shū)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
紅細(xì)胞酶缺陷的檢查可通過(guò)高鐵血紅蛋白還原實(shí)驗(yàn)、抗壞血酸,、Heinz 小體等檢測(cè),, 高鐵血紅蛋白還原檢測(cè)試劑盒采用 Schumm 法,其檢測(cè)原理是在有足夠的NADPH 存在下,,高鐵血紅蛋白能被高鐵血紅蛋白還原酶還原成亞鐵血紅蛋白,,當(dāng)紅細(xì)胞內(nèi)葡萄糖-6-磷酸脫氫酶含量正常時(shí),由磷酸戊糖代謝途徑生成的 NADPH 的數(shù)量足以完成上述還原反應(yīng)當(dāng)紅細(xì)胞內(nèi) G6PD 含量不足或缺乏時(shí),,高鐵血紅蛋白還原速度減慢,,甚至不能還原,高鐵血紅蛋白呈褐色,,用分光光度計(jì)在 635nm 波長(zhǎng)處檢測(cè),。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,,不適用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
名稱(chēng) | 規(guī)格 50T | Storage |
試劑(A): 抗凝劑 | 5ml | 4℃ |
試劑(B): Hb Assay Buffer | 1.5ml | 4℃ |
試劑(C): Hb 顯色液 | 1.5ml | 4℃ 避 光 |
試劑(D): G6PD Buffer | 100ml | 4℃ |
使用說(shuō)明書(shū) | 1 份 |
自備材料:
1,、離心管或試管
2,、水浴鍋或恒溫箱
3、比色杯
4,、分光光度計(jì)
操作步驟(僅供參考):
1,、取新鮮靜脈血 0.9ml,加入抗凝劑 0.1ml,,充分混勻,。
2、低速離心 15min,,取出,,調(diào)整血細(xì)胞與血漿比例為 1:1 后再混勻。
3,、取上述抗凝血 0.5ml,,加入 Hb Assay Buffer 和 Hb 顯色液各 0.025ml,顛倒混勻 15 次,,使與氧氣充分接觸,,加塞或密封后放置于 37℃水浴鍋或恒溫箱中孵育 3h?;靹?, 取上述血液 0.02ml 加入 G6PD Buffer 2ml。
上述操作,,可見(jiàn)下表:
加入物(ml) | 空白管 | 測(cè)定管 |
抗凝血 | 0.5 | 0.5 |
Hb Assay Buffer | - | 0.025 |
Hb 顯色液 | 0.025 | 0.025 |
混勻,,放置于 37℃水浴鍋或恒溫箱中孵育 3h。 | ||
取上述反應(yīng)液 | 0.02 | 0.02 |
G6PD Buffer | 2 | 2 |
4,、混勻,,室溫放置 2min,比色杯光徑 1cm,,用分光光度計(jì) 635nm 處測(cè)定空白管和測(cè)定管吸光度,,分別命名為 SA 和 B。
5,、向空白管加入 Hb Assay Buffer 0.025ml,,混勻,室溫放置 5min,,再次用分光光度計(jì)
635nm 處測(cè)定空白管吸光度命名為 ST,。
計(jì)算:高鐵血紅蛋白還原率(%)={1-(SA-B)/(ST-B)}×100% 參考區(qū)間:一般應(yīng)超過(guò) 75%
1、 紅細(xì)胞比容低于 30%時(shí),,高鐵血紅蛋白還原率顯著下降,,需調(diào)整紅細(xì)胞與血漿的比例。
2,、 樣本不應(yīng)有凝血或溶血,,以免影響測(cè)定。
3,、 為了您的安全和健康,,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期:6 個(gè)月有效,。
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請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
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