葡萄糖檢測試劑盒(Folin-Wu 微板法)檢測原理是葡萄糖在加熱的堿性環(huán)境中銅離子還原成氧化亞銅沉淀,，后者使磷鉬酸還原成鉬藍(lán),，使溶液呈藍(lán)色，顏色深淺與葡萄糖含量成正比,，其最高吸收峰為 420nm,，利用酶標(biāo)儀測定樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度值,，通過公式可以計算出樣品的葡萄糖含量，本試劑盒可用于人或動物的血清,、血漿,、腦脊液、細(xì)胞,、組織,、細(xì)胞培養(yǎng)基等樣本中的葡萄糖含量定量測定。本試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,，不宜用于臨床診斷或其他用途,。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

1、蒸餾水,、PBS,、生理鹽水

2、離心管,、96 孔板

3,、水浴鍋

4、酶標(biāo)儀

操作步驟(僅供參考)：

1,、樣本處理：

①血清,、血漿、腦脊液樣本：從待測樣本中分離出的血清或血漿不應(yīng)有溶血,，一般需要去除蛋白質(zhì)(即為無蛋白血濾液)后再經(jīng)檢測,。取抗凝血 0.1ml，加入 0.7ml 蒸餾水和 0.1ml 蛋白酸化液,，混勻,，緩慢加入 0.1ml 蛋白沉淀液，邊加邊搖勻,，至出現(xiàn)暗紅色蛋白質(zhì)沉淀,，靜置 10min，3000g 離心 5min,，取上清液即為無蛋白血濾液,，4℃保存?zhèn)溆谩?/span>

②組織樣本：準(zhǔn)確稱取適量組織樣本，按質(zhì)量(g)：生理鹽水或 PBS(ml)=1：9 的比例,，加入生理鹽水或PBS,，冰浴條件下手動或機械勻漿，2500~3000g 離心 10min,，取上清待用,。

③細(xì)胞樣本：

a、取適量的細(xì)胞(一般推薦>106 以上),，1000g 離心 10min,，棄上清,，留取沉淀。b,、用 PBS 或生理鹽水清洗 1~2 次,，1000g 離心 10min，棄上清,，留取沉淀,。

c、加入 200~300μl 的 PBS 或生理鹽水勻漿,，冰浴條件下超聲破碎細(xì)胞,，功率 300W，每次 3~5s,，間隔 30s,，重復(fù) 3~5 次。亦可手動勻漿,，制備好的勻漿液不可離心,；亦可用 1~2% Triton X-100 冰浴 30~60min，制備好的裂解液不可離心,。

2,、制備 Glu 標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液（0.55mmol/L）：取 10ul Glu 標(biāo)準(zhǔn)儲存液(55mmol/L)，補加蒸餾水或者無菌水 990ul,，充分混勻即可,。根據(jù)需用量，臨用前按比例配置,，不宜久存,。

3、Glu 加樣：按照下表設(shè)置空白管,、標(biāo)準(zhǔn)管,、測定管，溶液應(yīng)按照順序依次加入,，并注意避免產(chǎn)生氣泡，如果樣品中的 Glu 濃度過高,，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定,。

充分混勻, 置于沸水浴煮沸 8min，取出,，在冷水中冷卻,，注意不能搖動，靜置 10min,， 分別加入 750μl 蒸餾水,。

4,、Glu 測定：取 200μl 上述溶液，加入 96 孔板中,，以空白孔調(diào)零,，用酶標(biāo)儀在 420nm 處讀取標(biāo)準(zhǔn)孔和測定孔的吸光度。

計算：葡萄糖含量(mmol/L)=(測定管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度)×0.55×10

=(測定管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度)×5.5 其中 10 為去蛋白樣品的稀釋倍數(shù)

注意事項：

1,、 待測樣本如不能及時測定,，應(yīng)置于 2~8℃保存，3 天內(nèi)穩(wěn)定,。

2,、 上述低溫試劑避免反復(fù)凍融，以免失效或效率下降,。

3,、 Glu 標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液臨用前按比例配置，不宜久存,。

4,、 如樣品吸光度值偏大，則需再次稀釋后重新檢測,。

5,、 樣品中含有蛋白等干擾物質(zhì)時，須用去蛋白的方法處理后再行檢測,。

6,、 煮沸時不能動搖。

有效期： 6 個月有效,。4℃運輸,，4℃保存。