產(chǎn)品簡介：

革蘭氏染色法是丹麥醫(yī)生Christain Gram 于 1884 年所發(fā)明,，是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法,，亦是一種復(fù)染法,。未經(jīng)染色的細(xì)菌,，由于其與周圍環(huán)境折光率差別甚小， 故在顯微鏡下極難觀察,。染色后細(xì)菌與環(huán)境形成鮮明對比,，可以清楚地觀察到細(xì)菌的形態(tài)、排列及某些結(jié)構(gòu)特征,，用以分類鑒定,。通過此法染色可將細(xì)菌鑒別為革蘭陽性菌(G+)和革蘭  陰性菌(G-)兩大類。細(xì)菌的不同顯色反應(yīng)是由于細(xì)胞壁對乙醇的通透性和抗脫色能力的差異,， 主要是肽聚糖層厚度和結(jié)構(gòu)決定的,。經(jīng)結(jié)晶紫染色的細(xì)胞用碘液處理后形成不溶性復(fù)合物， 乙醇能使它脫色,。在革蘭陰性細(xì)胞染色中,，乙醇或丙酮破壞了胞壁外膜、損傷肽聚糖層和細(xì)  胞質(zhì)膜,，結(jié)晶紫和碘復(fù)合物從細(xì)胞中滲漏出來,，當(dāng)再用其他染色液復(fù)染時，顯現(xiàn)紅色,。紅色  染料雖然也能進(jìn)入已染成紫色的 G+細(xì)胞,，但被紫色蓋沒，所以紅色顯示不出來,。在革蘭陽性細(xì)胞染色中,，乙醇還能使厚的肽聚糖層脫水，導(dǎo)致孔隙變小,，由于結(jié)晶紫和碘復(fù)合物分子  太大,，不能通過細(xì)胞壁，不易脫色,，所以保持著紫色,。

Enhanced Gramˊs stain 采用經(jīng)典的革蘭染色配方進(jìn)一步改進(jìn)，使用復(fù)紅復(fù)染液替代沙黃染色液,，增強(qiáng)了染色效率,，用于極難染色的細(xì)菌。臨床標(biāo)本直接涂片,，背景干凈,，胞核胞質(zhì)對比強(qiáng)烈,，胞內(nèi)吞噬體清晰易辨認(rèn)，細(xì)菌染色特征典型,。

產(chǎn)品組成：

   自備材料：

1,、接種環(huán)或挑取細(xì)菌的其他工具

2、酒精燈

3,、載玻片

4,、光學(xué)顯微鏡

   操作步驟(僅供參考)：

1、涂片：取待檢細(xì)菌,，于載玻片中央涂成薄層或者或在載玻片上滴加少許無菌水,，取菌與的水混合均勻，涂成一薄層,。

2,、干燥：涂片后在室溫下自然干燥，也可在酒精燈上略加溫,，使之迅速干燥,。

3、固定：手持載玻片一端,，標(biāo)本面朝上,，在酒精燈的火焰外側(cè)快速來回移動 3~5 次，每次 1s,，溫度不宜過高,，防止菌體蛋白變性，放置待涼后染色,。也可以用甲醇或乙醇固定,。

4、初染：滴加結(jié)晶紫染色液染色 1~2min,，清水沖洗去染色液,。

5、媒染：滴加 Gram 碘液,，并覆蓋載玻片,，室溫放置 1~2min，水洗,。

6,、脫色：滴加脫色液，搖動 10～30s,，直至流下的脫色液不出現(xiàn)紫色時為止,，立即用水沖去脫色液，終止反應(yīng),。

7,、復(fù)染：滴加復(fù)紅復(fù)染液染色 30~60s,，水洗。

8,、干燥,。鏡檢：置油鏡觀察。

  染色結(jié)果：

             革蘭氏陽性菌             藍(lán)色至紫色

       革蘭氏陰性菌               紅色

注意事項：

1,、涂片之前,，應(yīng)事先在背面做好圓圈標(biāo)記，以便判斷后續(xù)試驗的位置,。

2,、取細(xì)菌時，應(yīng)注意自我防護(hù),，拔或塞試管塞時，應(yīng)將試管口通過火焰略加燒灼,，最后將接種環(huán)在火焰上燒灼滅菌,。

3、加熱固定涂片時,，應(yīng)注意玻片勿太靠近火焰,，一般要求玻片溫度不超過 60℃，以玻片背面觸及手背皮膚不覺過燙為宜,。

4,、革蘭氏染色的關(guān)鍵在于嚴(yán)格掌握脫色程度，脫色時間應(yīng)根據(jù)經(jīng)驗判斷,。脫色過度,，陽性菌可被誤染為陰性菌；脫色不夠,，陰性菌可被誤染為陽性菌,。

5、待檢細(xì)菌培養(yǎng)時間會影響染色,，陽性菌培養(yǎng)時間過長或已死亡或細(xì)菌溶解,，常呈陰性。

有效期： 12 個月有效,。