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產(chǎn)品名稱: OVCAR3細(xì)胞;人卵巢腺癌細(xì)胞
細(xì)胞數(shù)量: 1*10^6
組織來源: 人卵巢腺
細(xì)胞種屬: 人源
生長特性: 貼壁
培養(yǎng)基: RPMI-1640
形態(tài)特征: 上皮樣
傳代方法: 1:2 to 1:4
培養(yǎng)條件: 胎牛血清至終濃度為10%,。環(huán)境:空氣,,95%;二氧化碳(CO2),,5%;溫度,,37℃
細(xì)胞凍存: 液氮凍存(凍存液基礎(chǔ)培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO)
細(xì)胞運(yùn)輸: 干冰運(yùn)輸(2ml凍存管)或活細(xì)胞運(yùn)輸(T25瓶)
注意事項(xiàng)
凍存細(xì)胞接收后的處理:
1.干冰運(yùn)輸,,收到細(xì)胞后立即轉(zhuǎn)入-80℃冰箱短暫中轉(zhuǎn)或直接復(fù)蘇;
2.收到細(xì)胞后,,若發(fā)現(xiàn)干冰已經(jīng)*揮發(fā),、凍存管瓶蓋破裂脫落,請(qǐng)立即拍照后與我們聯(lián)系。
復(fù)蘇細(xì)胞接收后的處理:
1.收到細(xì)胞后,,請(qǐng)首先檢查培養(yǎng)瓶是否破損或漏液,,培養(yǎng)液是否混濁,如有漏液及培養(yǎng)液混濁情況請(qǐng)立即拍照把圖片發(fā)給我們,。
2.75%酒精消毒瓶身后放培養(yǎng)箱中靜置4-6h后,,在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)并拍照100倍和200倍的照片,若有貼壁細(xì)胞脫落,,可收集上清離心,,將沉淀用新的培養(yǎng)基接種至新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中。
3.建議收到當(dāng)天不要消化處理,,如果細(xì)胞長滿90%,,可選擇傳代處理。
4.如您收到細(xì)胞3天內(nèi)沒有反饋相關(guān)問題,,出現(xiàn)的細(xì)胞問題將不提供免費(fèi)重發(fā)服務(wù),。
OVCAR3細(xì)胞;人卵巢腺癌細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),,使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時(shí)間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。
合作單位:
中國藥科大學(xué)、中國海洋大學(xué),、福建茶葉研究所,、北京大學(xué)、遵復(fù)旦大學(xué),、廣州醫(yī)學(xué)院,、山東大學(xué)、浙江大學(xué),、浙江理工大學(xué)等單位,。
該產(chǎn)品用戶遍及各院校科研單位,,質(zhì)量保證,,價(jià)格優(yōu),以完善的產(chǎn)品渠道,、優(yōu)質(zhì)的客戶服務(wù),節(jié)約您的每一份經(jīng)費(fèi),,歡迎咨詢訂購。
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