產品名稱：鏈霉親和素；cas：9013-20-1生物技術級,，17u/mg

別名：鏈酶親和素;鏈霉抗生物素蛋白;鏈親和素

介紹：鏈親和素（SA）是阿維丁鏈霉菌（Streptomyces avidinii）表達的一種小分子蛋白,。本制品為127AA比較佳核心結構，每分子SA結合4個生物素分子,，比活性12~15U/mg,。SA與禽類親和素（Avidin，AV）相比特異性更強,，與生物素結合后半衰期長達6h,，而AV半衰期僅為1h。由于SA不含糖基且等電點接近中性,，因此SA在檢測應用中具有比AV更低的非特異性背景,。

用途：本制品已廣泛應用于制備SA-偶聯(lián)酶制劑（如SA-HRP，SA-AP等）,，SA-偶聯(lián)熒光素（即熒光染料,，如SA-FITC，SA-Cy2,，SA-Cy3等）,、SA-偶聯(lián)磁珠等，進而參與酶聯(lián)免疫吸附檢測（ELISA）、免疫組化,、親和色譜填料,、含StrepTagII標簽（8-AA寡肽）的蛋白純化、生物傳感器,、生物納米微球,、預靶向制藥研究、生物芯片被料等生物技術領域,。

優(yōu)點：高親和力,，高偶聯(lián)效率。

注意事項：

1.凍干粉溶解后應避免反復凍融,，建議分裝成小包裝后分別凍存,。

2.凍干粉中含20mMNa2CO3 pH9.5的緩沖體系，若用于包被,，酶標可以直接使用,。若用于膠體金，調節(jié)pH或透析后使用,。溶解后立即使用效果比較好,，不能4℃長期存放。

3.若用于ELISA包板,，膠體金烘金,，硝酸纖維素膜上用SA劃線后需要烘干保存，包被液或緩沖液中需加入20%蔗糖作為活性保護劑,。

【操作步驟簡述】

一,、微孔板包被

1、用碳酸鈉緩沖溶液（pH 9.6）溶解凍干粉,，將濃度稀釋成3-10ug/ml（客戶可設定梯度進行實驗）

注意：由于SA等電點是7.4,，包被不建議使用中性緩沖液

2、用移液器吸取100ul/孔,，4℃過夜包被或者37℃包被2h,；

3、洗滌：倒盡板孔中液體,，加200ul洗滌液,，靜放三分鐘，反復三次,，后將反應板倒置在吸水紙上,，使孔中洗滌液流盡，扣干

4,、后續(xù)進入封閉,、洗滌、抗原抗體結合流程

若不立即進入下游實驗,，包被板需要進行烘干保存時,。包被前，將包被液中加入20%蔗糖作為活性保護劑,。

二,、SA偶聯(lián)磁珠

2.1 NHS 活化

1、充分混勻磁珠后,，取100μl PangoBeads COOH 磁珠到1.5 ml 離心管中,，置于磁性分離上，待固液分離后去除上清液,；

2,、取200μl MES溶液（25mM，pH 5.0）加入到離心管中,，置于磁性分離上,，待固液分離后去除上清液。重復該步驟1 次,； **3,、迅速加入新配制的50μl EDC 溶液和50μl NHS 溶液 （均為50mg/ml， 以上述MES 配制）到裝有磁珠的離心管中,，漩渦混勻使磁珠充分懸浮,，室溫下垂直混合30min； **4,、反應結束后,，加入100μl 上述 MES 溶液洗滌 2 次；（活化狀態(tài)不宜長時間保存,， 建議立即進行偶聯(lián)）

2.2 蛋白偶聯(lián)

1,、將離心管置于磁性上，分離去除上清液,，加入100μl蛋白溶液（25 mM MES,，pH 5.0） 輕柔地混勻；（蛋白濃度在0.1-2.0mg/ml）

2,、在室溫下垂直混合反應2h,，或在4℃條件下垂直混合過夜；

3,、反應結束后將離心管置于磁分離架上,，磁性分離去除上清液，加入1ml乙醇胺溶液 （3M,，pH9.0）洗滌磁珠 2 次,；

4,、加1ml乙醇胺溶液（3M, pH 9.0）于離心管中，渦旋30s,，將離心管置于垂直混合 儀中室溫反應1-2h,；

5、反應結束后,，將離心管置于磁力架上,，待固液分離后移除上清液，然后加入100μl 純化水輕柔渦旋 30s,，磁吸分離,，重復該步驟 1 次；

6,、加入適量的保存液（可根據(jù)需要來確定保存溶液的加入量,，以調整偶聯(lián)配體磁珠的加入適量的保存液（可根據(jù)需要來確定保存溶液的加入量，以調整偶聯(lián)配體磁珠的濃度）保存于4°,，如果固定的生物配體穩(wěn)定,，可以在保存溶液中加入0.02%（W/V）作為抑菌劑。

外觀： 凍干粉

敏感性： 對熱敏感,易吸潮

儲存條件： -20℃