產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

      正常精液是一種混合物，由睪丸和附睪的分泌物及懸浮其中的精子與前列腺,、精囊腺和尿道球腺的分泌物混合而成,，終射出的混合物是一種粘稠的液體。精子分析的方法有很多,，其中可通過(guò)培養(yǎng)進(jìn)行檢測(cè),。隨著生殖工程技術(shù)的興起及發(fā)展，供精人工授精（AID）已經(jīng)成為治療某些不可恢復(fù)或無(wú)法治療的男性不育癥的重要療法,，其中精液冷凍是其中的重要環(huán)節(jié),。在一定的低溫條件下，以一定的時(shí)間作用于生物組織細(xì)胞,，引起細(xì)胞的降溫,、凝固、非損傷性結(jié)冰,，使生物體內(nèi)分子運(yùn)動(dòng)的速度減慢,、停止，從而使細(xì)胞代謝降低,，處于休眠狀態(tài),，達(dá)到貯存細(xì)胞的目的。

         精子冷凍保護(hù)劑主要由甘油,、葡萄糖,、枸櫞酸鈉、抗生素等組成,，經(jīng)無(wú)菌處理,，其基本原理是在細(xì)胞冷凍過(guò)程中隨著溫度不斷下降，細(xì)胞外液中作為各種電解質(zhì)溶劑的水分首先形成細(xì)小的顆粒狀冰晶,，導(dǎo)致細(xì)胞外水份減少,，電解質(zhì)濃度增加，細(xì)胞外液滲透壓升高,，使細(xì)胞內(nèi)外液滲透壓失去平衡,，水分將從滲透壓低的內(nèi)液通過(guò)細(xì)胞膜流向滲透壓高的外液,，于是細(xì)胞自身脫水皺縮，用冷凍過(guò)程中產(chǎn)生的滲透壓的梯度使細(xì)胞皺縮,，而不損傷細(xì)胞,。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途,。

自備材料：

1,、 程序冷凍儀

2、 水浴箱,、恒溫培養(yǎng)箱

3,、 冰箱,、液氮罐,、冷凍管

4、 1ml 注射器

操作步驟(僅供參考)：

(一)人類(lèi)精液快速冷凍步驟

1,、精液取出后,，在 37℃的水浴箱中液化。

2,、精液液化后按照 WHO 的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行常規(guī)分析,，包括精液量、顏色,、氣味,、PH 值、液化

狀況,、精子密度,、活動(dòng)率,、圓細(xì)胞數(shù)等，并做好相關(guān)記錄,。

3,、提前將冷凍保護(hù)劑復(fù)溫至室溫,。

4、將精液與冷凍保護(hù)劑按 1:1 的比例混勻，并分裝于冷凍管中,，冷凍管做好標(biāo)記。

5,、將冷凍管置入 4℃冰箱 15min,。

6,、將冷凍管置入－80℃液氮蒸氣中 15min。

7,、將冷凍管投入液氮中凍存。

(二)人類(lèi)精液程序冷凍步驟

1,、精液取出后,，在 37℃的水浴箱中液化。

2,、精液液化后按照 WHO 的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行常規(guī)分析,，包括精液量,、顏色,、氣味,、PH 值,、液化

狀況、精子密度、活動(dòng)率,、圓細(xì)胞數(shù)等,，并做好相關(guān)記錄。

3、提前將冷凍保護(hù)劑復(fù)溫至室溫,。

4,、將精液與冷凍保護(hù)劑按 1:1 的比例混勻，并分裝于冷凍管中,，冷凍管做好標(biāo)記,。

5,、將冷凍管置于程序冷凍儀中，開(kāi)始程序冷凍,。冷凍程序如下：

1）開(kāi)始溫度：20℃平衡 5-10min,；2）20℃→0℃，冷凍速率-1℃/min,；3）0℃→-30℃,，

冷凍速率-6℃/min；4）-30℃→-80℃,，冷凍速率-30℃/min,。

6、從程序冷凍儀中取出冷凍管,，投入液氮中凍存,。

(三)復(fù)蘇步驟

冷凍過(guò)程中精子發(fā)生的一系列變化也會(huì)表現(xiàn)在解凍時(shí)的反向順序中，而快速?gòu)?fù)溫

(100℃/min 左右)可避免精液在溶解前的再次形冰晶成,，具體步驟為：將貯存于液氮中的精

液冷凍管取出,，快速放入 37℃的水浴箱中復(fù)溫即可。

注意事項(xiàng)：

1,、 注意無(wú)菌操作,，盡量避免污染。

2,、 影響精液冷凍貯存的因素主要有：冷凍程序,、冷凍保護(hù)劑、復(fù)蘇速率,、貯存方式,，及冷

凍前精液質(zhì)量等。

3,、 人們多使用液氮來(lái)貯存精液,，液氮是一種無(wú)色、無(wú)味的氣體,，其沸點(diǎn)為－195.8℃,。具

有低溫,、不助燃、不自燃,、不易爆炸,、來(lái)源豐富的優(yōu)點(diǎn)。

有效期：6 個(gè)月有效,。4℃保存 1 周有效,。