基本信息

• 產(chǎn)品名稱： Neuro-2a細(xì)胞;小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞
• 細(xì)胞數(shù)量： 1*10^6
• 組織來源： 腦組織
• 細(xì)胞種屬： 小鼠源
• 生長(zhǎng)特性： 貼壁
• 培養(yǎng)基： Eagle's Minimum Essential Medium
• 形態(tài)特征： 形態(tài)學(xué)神經(jīng)元和變形細(xì)胞干細(xì)胞
• 傳代方法： 1：3至1：6
• 培養(yǎng)條件： 胎牛血清至終濃度為10％,。環(huán)境：空氣，95％;二氧化碳（CO2）,，5％,；溫度，37℃
• 細(xì)胞描述： 神經(jīng)母細(xì)胞瘤的疾病 A株 應(yīng)用 該細(xì)胞系是合適的轉(zhuǎn)染宿主,。
• 細(xì)胞凍存： 液氮凍存（凍存液基礎(chǔ)培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO）
• 細(xì)胞運(yùn)輸： 干冰運(yùn)輸（2ml凍存管）或活細(xì)胞運(yùn)輸（T25瓶）

  注意事項(xiàng)

  凍存細(xì)胞接收后的處理：

  1.干冰運(yùn)輸,，收到細(xì)胞后立即轉(zhuǎn)入-80℃冰箱短暫中轉(zhuǎn)或直接復(fù)蘇；
  2.收到細(xì)胞后,，若發(fā)現(xiàn)干冰已經(jīng)*揮發(fā),、凍存管瓶蓋破裂脫落,請(qǐng)立即拍照后與我們聯(lián)系。

  復(fù)蘇細(xì)胞接收后的處理：

  1.收到細(xì)胞后,，請(qǐng)首先檢查培養(yǎng)瓶是否破損或漏液,，培養(yǎng)液是否混濁，如有漏液及培養(yǎng)液混濁情況請(qǐng)立即拍照把圖片發(fā)給我們,。
  2.75%酒精消毒瓶身后放培養(yǎng)箱中靜置4-6h后,，在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)并拍照100倍和200倍的照片，若有貼壁細(xì)胞脫落,，可收集上清離心,，將沉淀用新的培養(yǎng)基接種至新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,。
  3.建議收到當(dāng)天不要消化處理，如果細(xì)胞長(zhǎng)滿90%,，可選擇傳代處理,。
  4.如您收到細(xì)胞3天內(nèi)沒有反饋相關(guān)問題，出現(xiàn)的細(xì)胞問題將不提供免費(fèi)重發(fā)服務(wù),。

  細(xì)胞培養(yǎng)方法：

  1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
  ①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
  ②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶）,，使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
  ③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
  ④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
  ⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
  ⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
  2、細(xì)胞復(fù)蘇：
  ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
  ②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
  3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
  ①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
  ②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化,；
  ③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
  ④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。