原因
① 柱溫波動,。(即使是很小的溫度變化都會引起基線的波動,。通常影響示差檢測器、電導(dǎo)檢測器,、較低靈敏度的紫外檢測器或其它光電類檢測器,。)
②流動相不均勻。(流動相條件變化引起的基線漂移大于溫度導(dǎo)致的漂移,。)
③流通池被污染或有氣體
④檢測器出口阻塞,。(高壓造成流通池窗口破裂,產(chǎn)生噪音基線)
⑤流動相配比不當(dāng)或流速變化
⑥柱平衡慢,,特別是流動相發(fā)生變化時
⑦流動相污染,、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成
⑧樣品中有強(qiáng)保留的物質(zhì)(高K’值)以饅頭峰樣被洗脫出,從而表現(xiàn)出一個逐步升高的基線,。
⑨使用循環(huán)溶劑,,不提倡。未調(diào)整檢測器,。
⑩檢測器沒有設(shè)定在大吸收波長處,。
解決方法
①控制好柱子和流動相的溫度,在檢測器之前使用熱交換器
②使用HPLC級的溶劑,,高純度的鹽和添加劑,。流動相在使用前進(jìn)行脫氣,使用中使用在線脫氣或氦氣脫氣,。
③用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池,。如有需要,可以用1N的硝酸,。(不要用鹽酸)
④取出阻塞物或更換管子,。參考檢測器手冊更換流通池窗。
⑤更改配比或流速,。為避免這個問題可定期檢查流動相組成及流速,。
⑥用中等強(qiáng)度的溶劑進(jìn)行沖洗,更改流動相時,,在分析前用10-20倍體積的新流動相對柱子進(jìn)行沖洗,。使用離子對試劑、緩沖鹽更應(yīng)注意平衡柱,。
⑦檢查流動相的組成。使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級的溶劑
⑧改變分析條件,。使用保護(hù)柱,,如有必要,在進(jìn)樣之間或在分析過程中,定期用強(qiáng)溶劑沖洗柱子,。
⑨重新設(shè)定基線,。使用新的流動相。
⑩將波長調(diào)整至大吸收波長處,。重選檢測波長,。
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