一、去除樣品和流動相中的固體顆粒

樣品和流動相中含有的固體顆粒物質會堵塞色譜柱篩板,，篩板被堵住不僅會引起柱壓的升高，而且也會引起柱效下降,，因為篩板的堵塞會引起液流不均,，導致色譜峰型拖尾、變寬,，從而使柱效下降,。因此，建議使用超純水和色譜純試劑,，在分析樣品前對樣品進行針筒過濾,，流動相過0.45μm濾膜。

二,、流動相的pH應在使用的范圍內(nèi)
由于填料中存在Si-C和Si-O鍵,，流動相超過其pH范圍將會導致硅膠基質流失和鍵合相碳鏈斷裂，使柱效下降,，使用壽命變短,。由于流動相的pH 控制不當而對色譜柱造成的損害，通常很難使色譜柱恢復,，因此必須認真對待,，嚴格控制流動相的pH值。

三,、使用保護柱或在線過濾器
樣品和流動相經(jīng)過濾后并不能*消除固體顆粒物質,，因為泵的磨損、密封圈和管路的老化也會產(chǎn)生固體顆粒物質,，這些固體顆粒被流動相帶入色譜柱,，堵塞篩板，導致柱壓升高,、柱效下降,。保護柱和在線過濾器上都有篩板，其孔徑與色譜柱孔徑相同,，因此可以阻止固體顆粒物質到達色譜柱,，有效防止色譜柱篩板的堵塞。由于柱壓升高在分析故障中占很大比例,，因此,，除對樣品和流動相進行過濾外，建議您在色譜柱進樣端加上保護柱或在線過濾器,。
如果確認色譜柱柱壓升高是由于進樣端篩板被堵引起的,，可選擇以下方式進行補救：
1,、先在色譜柱前加上保護柱或在線過濾器，然后用甲醇,、水=20/80ml/min反向沖色譜柱180min,。
2、先在色譜柱進樣端加上保護柱或在線過濾器,，然后反向使用,。

四、正確使用緩沖鹽
緩沖鹽通常易溶于水,，難溶于有機溶劑,，因此緩沖鹽使用不當會使其析出，堵塞填料基質上的微孔和顆粒間的空隙,，使填料板結,，柱壓上升；同時阻礙了基質上鍵合的碳鏈自由舒展,，使色譜柱的保留能力下降,，柱效降低。緩沖鹽析出后,，去除非常困難,，因此，正確的使用緩沖鹽對延長色譜柱使用壽命非常重要,。
正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出,，因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結為一句話：使用前要過濾,，使用后要沖洗,。具體方法如下：

1、等度條件：使用緩沖鹽前和使用后需用過渡流動相以1.0ml/min流速沖洗60min,；使用后去除緩沖鹽的另一個方法是用過渡流動相以0.2ml/min流速沖洗色譜柱過夜,。
2、梯度條件：用含有緩沖鹽的流動相跑梯度之前,，用與初始流動相組成相同的過渡流動相以1.0ml/min流速沖洗60min,，再用該過渡流動相以1.0ml/min沖洗色譜柱120min。含緩沖鹽流動相的梯度設定應盡量平緩,，以避免梯度過程中緩沖鹽析出,。
注意：過渡流動相是指有機相和水相的組成與分析流動相相同，區(qū)別只是過渡流動相不含緩沖鹽,。
3,、緩沖鹽析出的補救方法：
1）方案1：用甲醇/20/80以1.0ml/min流速35攝氏度條件下反向沖洗色譜柱120min
2）方案2：用甲醇/水=20/80以0.2ml/min流速反向沖洗色譜柱過夜。

五,、防止強保留物質在色譜柱上存留
強保留物質和大分子化合物在色譜柱中累積,，對樣品中的化合物產(chǎn)生額外的保留行為，不僅引起峰型變寬、拖尾,，使柱效下降,，同時也會引起保留時間的變化，累積到一定程度時還會導致柱壓升高,。由于強保留物質和大分子化合物對色譜分離的影響是一個累積效應,，需要一定的時間才會體現(xiàn)出來，但對許多藥品特別是復雜樣品而言,，很難判斷其是否是含有強保留物質,，因此要防止強保留物質的累積，需要在每天的日常維護中用純甲醇或乙氰清洗色譜柱,。 clin-lab.com

清洗方法：
1,、未使用緩沖鹽：每天分析完成后，先用上述方法除去緩沖鹽,，然后再用甲醇或乙氰反向沖洗色譜柱60min,。
2、使用過緩沖鹽：分析完成后,，先用上述方法除去緩沖鹽,，然后在用純甲醇或乙氰反向沖洗色譜柱60min
3、補救方法：
水——乙氰——氯仿（或異丙醇）——乙氰——水
每一步以1.0ml/min流速反向沖洗色譜柱60min,。
 

色譜柱日常維護注意事項：

（1）流動相的PH值應有使用范圍內(nèi) 
由于流動相的PH 控制不當而對色譜柱造成的損害,，通常很難是色譜柱恢復，因此必須認真對待,，嚴格控制流動相的PH值,。
（2）去除樣品和流動相中的固體顆粒 
樣品和流動相中含有的固體顆粒物質會堵塞色譜柱篩板，篩板被堵住不僅會引起柱壓的升高,，而且也會引起柱效下降,，因為篩板的堵塞會引起液流不均，導致色譜峰型拖尾,、變寬,，從而使柱效下降。因此,，建議使用超純水和色譜純試劑,，在分析樣品前對樣品進行針筒過濾，流動相過0.45μm濾膜,。 
（3）使用保護柱或在線過濾器 
樣品和流動相經(jīng)過濾后并不能*消除固體顆粒物質,，因為泵的磨損、密封圈和管路的老化也會產(chǎn)生固體顆粒物質,，這些固體顆粒被流動相帶入色譜柱,，堵塞篩板,，導致柱壓升高、柱效下降,。保護柱和在線過濾器上都有篩板,，其孔徑與色譜柱孔徑相同，因此可以阻止固體顆粒物質到達色譜柱,，有效防止色譜柱篩板的堵塞,。由于柱壓升高在分析故障中占很大 比例，因此,，除對樣品和流動相進行過濾外,，建議您在色譜柱進樣端加上保護柱或在線過濾器。