豆芽中有機磷類農(nóng)藥殘留的氣相色譜質(zhì)譜法測定

        近年來,，蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)不斷發(fā)展,，運用氣相色譜、氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測有機磷類農(nóng)藥殘留的方法十分成熟,。前處理也出現(xiàn)了QuEChERS等新技術(shù),，但目前在國內(nèi)實際應(yīng)用較少。本試驗結(jié)合實驗室條件,，采用固相萃取技術(shù),，建立了豆芽中有機磷農(nóng)藥殘留的氣相色譜一質(zhì)譜檢測法，為進一步規(guī)范市場提供,。

1  材料與方法

1.1儀器與試劑

日本島津GC2010氣相色譜質(zhì)譜儀,，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，固相萃取裝置,，氮吹儀,，離心機；

C18柱：2 000 mg（Varian）,；  

PSA柱：500 mg（Varian）,；

正己烷（色譜級），丙酮（色譜級）,。

1.2溶液配制及貯存

取農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品甲拌磷,、甲基對硫磷、甲基嘧啶磷,、馬拉硫磷,、毒死蜱、喹硫磷,、殺撲磷,、殺蟲畏、丙溴磷,、乙硫磷（國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心提供,，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)濃度均為100ug／ml）各l ml，用正己烷定容至10 ml,，得到濃度為10 ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液,，4℃冷藏保存，作為標(biāo)準(zhǔn)貯備液,。分別用正己烷稀釋（濃縮）為1,、2、3、4,、5 ug/ml,，作為標(biāo)準(zhǔn)工作液,。    洗脫液配制：丙酮：正己烷=2：8

1.3樣品制備

1.3.1樣品前處理稱取樣品10 9,，攪碎，加入20 ml乙腈,，超聲波提取15 min,，加入氯化鈉2.5 g，4 000 r/rain離心5 min,。上清液待用,。

1.3.2凈化濃縮  C18柱凈化：預(yù)先用乙腈（5 ml x2）和純水（5ml x2）平衡C18柱，將上清液移人C18柱,，12 ml乙腈+水（3+1）淋洗柱子,，真空抽干。用洗脫液定容至lml,。

PSA柱凈化：PSA柱預(yù)先用洗脫液（5 ml x2）平衡,，將上述1 ml樣液過柱，3ml洗脫液洗脫5次,，40℃水浴蒸發(fā),，氮吹定容至lml，待用,。

1.4色譜質(zhì)譜條件

色譜柱：毛細(xì)管柱Rtx -5,，30 mx0.25 mmx0. 25 um。

氣相色譜條件：柱溫（程序升溫）：60℃保持3 rain．以20C/min升至200℃,，以2℃/min升至220℃,，再以20℃/min升至280C，保持9 min,；進樣口溫度：260C,；載氣：氦氣≥99.995%，1 ml/min,；進樣量：2ul,。

質(zhì)譜測定條件：GC - MS接口溫度：280℃；離子源溫度：200℃,；質(zhì)譜檢測方式：SIM方式（選擇離子檢測）,。

定性確認(rèn)：在保留時間窗口內(nèi)出現(xiàn)與對應(yīng)目標(biāo)化合物監(jiān)測離子相一致的峰，且與目標(biāo)監(jiān)測離子比例一致,，視為疑似檢出,。必要時，需要SCAN方式進一步確認(rèn)。

1.5定性分析標(biāo)準(zhǔn)和方法

色譜峰采用全掃描譜庫檢索與提取相應(yīng)保留時間質(zhì)量色譜圖進行特征離子定性相結(jié)合的方法定性,。定性標(biāo)準(zhǔn)：確定每種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中的2個特征離子,，1個定量離子（見表1）；在相應(yīng)保留時間下,，所選離子均應(yīng)出現(xiàn),，且所選擇的離子豐度比與標(biāo)準(zhǔn)樣品的離子豐度比相一致（允許有±20%的偏差）。

1.6定量分析方法

采用外標(biāo)法單離子定量測定,，即以各自基峰離子作為定量離子,，扣除空白后，峰面積與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較定量,。計算公式如下,。為減少基質(zhì)的影響，定量用標(biāo)準(zhǔn)溶液用空白溶液配制,，且標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度與待測化合物的濃度接近,。

X=Ai'C'V/As- in

式中：X-試樣中目標(biāo)化合物含量，mg/kg,；Ai-樣液中目標(biāo)化合物峰面積,；As-標(biāo)準(zhǔn)溶液中目標(biāo)化合物峰面積；C一標(biāo)準(zhǔn)工作液中目標(biāo)化合物的濃度,，ug/ml,；v--zui終樣液體積，ml;m-zui終樣液所代表的試樣量,，g,。

2結(jié)果與分析

2.1特征離子的選擇

本試驗采用選擇離子檢測模式（ SIM），選擇特征離子進行檢測能有效地降低背景干擾,，提高測定靈敏度,。根據(jù)農(nóng)藥出峰順序采用分時間段檢測模式，在某一時間段檢測一個或幾個待測物質(zhì),，使得特征離子在單位時間內(nèi)被掃描的次數(shù)增多,，降低背景干擾，提高信噪比,，檢測的組分分段完成,。    特征離子的選擇遵循以下原則：（1）專屬性：表征某一特定組分的特征離子質(zhì)量數(shù)盡量不與表征其它組分的特征離子質(zhì)量數(shù)相同。（2）靈敏度：碎片離子豐度應(yīng)盡量大,。（2）重現(xiàn)性：選擇質(zhì)量數(shù)大,、對稱性高、重現(xiàn)性好的離子,。根據(jù)此原則,，選擇的特征離子見表1。

2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線制作

取配制好的標(biāo)準(zhǔn)溶液，進樣,，定性確定有機磷農(nóng)藥品種及保留時間,，而后SIM方式下進樣，獲得標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)圖譜（圖1）,。測得不同濃度標(biāo)準(zhǔn)定量離子的峰面積,，繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線（表2）。

10種有機磷農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)在0. 9901  -0.9988之間,；方法定量檢出下限（S/N=10,，n=3）在2.6-3.8 ug/kg之間,；測定結(jié)果的誤差小于算術(shù)平均值的5.2% -13.5%,。2.3  市場抽樣檢測結(jié)果

為了解市場上豆芽產(chǎn)品的農(nóng)藥殘留情況，我們從泰安市場上隨機抽取13個農(nóng)貿(mào)市場銷售的豆芽樣品26份,，對上述10種有機磷農(nóng)藥殘留進行檢測,，所得譜圖如圖2，回收率60%一85%,。

檢測結(jié)果（表3）表明,，所檢豆芽樣品均未檢出上述10種有機磷農(nóng)藥殘留，單項合格率100%,。雖本試驗檢測的10項指標(biāo)全部合格,，但仍不排除使用其它藥劑的可能性。

3結(jié)論

本試驗建立了豆芽中10種有機磷農(nóng)藥殘留

的氣相色譜一質(zhì)譜分析方法,。該方法前處理簡單,，樣品雜質(zhì)較少，分離較好,，無明顯雜峰，10種農(nóng)殘標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)在0.9901 -0.9988之間,；方法定量檢出下限（S/N=10,，n=3）在2.6 -3.8 ug,/kg之間,；測定結(jié)果的誤差小于算術(shù)平均值的5.2% -13.5%,，回收率60%~80%。對泰安13個農(nóng)貿(mào)市場26個批次豆芽產(chǎn)品進行檢測，10種有機磷農(nóng)藥殘留均為未檢出,，單項合格率100%。