此方法適用于小量質(zhì)粒DNA的提取,，提取的質(zhì)粒DNA可直接用于酶切、PCR擴增,、銀染序列分析,。方法如下：
1,、接1%含質(zhì)粒的大腸桿菌細胞于2ml LB培養(yǎng)基
2,、37℃振蕩培養(yǎng)箱過夜
3、取1.5ml菌體于Ep管,，以4000rpm離心3min,，棄上清液
4、加0.lml溶液I(1％葡萄糖,，50mM/L EDTA pH8.0,，25mM/L Tris-HCl pH8.0)充分混合
5、加入0.2ml溶液 II(0.2 mM/L NaOH,，1％ SDS),，輕輕翻轉(zhuǎn)混勻，置于冰浴5 min
6,、加入0.15ml預(yù)冷溶液III(5 mol/L KAc,，pH4.8)，輕輕翻轉(zhuǎn)混勻,，置于冰浴5 min
7,、以10,000rpm離心20min，取上清液于另一新Ep管
8,、加入等體積的異戊醇,，混勻后于0℃靜置10min
9、再以10,000rpm離心20min,，棄上清
10,、用70％乙醇0.5ml洗滌一次，抽干所有液體
11,、待沉淀干燥后,，溶于0.05mlTE緩沖液中
20
立即詢價
您提交后，專屬客服將第一時間為您服務(wù)