二氧化碳培養(yǎng)箱是通過(guò)在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個(gè)類(lèi)似細(xì)胞/組織在生物體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境如穩(wěn)定的溫度(37°C),、穩(wěn)定的CO2水平(5%),、恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對(duì)濕度(95%),,來(lái)對(duì)細(xì)胞/組織進(jìn)行體外培養(yǎng)的一種裝置。 廣泛應(yīng)用于細(xì)胞,、組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng),,常見(jiàn)于細(xì)胞動(dòng)力學(xué)研究、哺乳動(dòng)物細(xì)胞分泌物的收集,、各種物理,、化學(xué)因素的致癌或毒理效應(yīng)、抗原的研究和生產(chǎn),、培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)抗體,、體外授精(IVF)、干細(xì)胞,、組織工程,、藥物篩選等研究領(lǐng)域,。
在生物活體內(nèi),生物體有自身的免疫系統(tǒng)保護(hù)細(xì)胞或組織,,但是在體外培養(yǎng)時(shí),,沒(méi)有任何保護(hù)自己的免疫屏障。對(duì)于二氧化碳培養(yǎng)箱的基本參數(shù)溫度,、CO2 和濕度,,大多數(shù)培養(yǎng)箱都能滿(mǎn)足研究實(shí)驗(yàn)的需要。然而,,針對(duì)培養(yǎng)過(guò)程中面臨的各種污染源,,各品牌二氧培養(yǎng)箱的控制方式和效果不盡相同,因此細(xì)胞體外培養(yǎng)中zui大的威脅實(shí)際上是污染問(wèn)題,。
對(duì)于細(xì)胞來(lái)說(shuō),,非常理想的培養(yǎng)環(huán)境同樣也適合這些污染物的生存,培養(yǎng)箱本身是不會(huì)辨別的,,而細(xì)胞培養(yǎng)中大部分時(shí)間里細(xì)胞都是位于培養(yǎng)箱內(nèi),,因此箱體內(nèi)能否抑菌或滅菌非常關(guān)鍵!
細(xì)菌:細(xì)菌污染后,培養(yǎng)基1-2天就會(huì)變色,,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響明顯,,應(yīng)迅速將污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離,滅菌后丟棄,,還要用實(shí)驗(yàn)室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺(tái),。
病毒:由于病毒寄生生存,爆發(fā)后盡快和正常細(xì)胞隔離,,丟棄處理,,相對(duì)來(lái)說(shuō)容易處理,對(duì)操作者威脅較大;盡管病毒污染的細(xì)胞不影響原代培養(yǎng),,但生產(chǎn)疫苗是不安全的,。因此,潛在病毒是細(xì)胞大量生產(chǎn)和疫苗,、干擾素等生物制品制作中的難題,。
真菌(霉菌和酵母菌):真菌生長(zhǎng)的比較慢,不像細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn),,但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了;目前沒(méi)有好的抑制方法,,包括現(xiàn)在常用的兩性霉素,一旦污染容易反復(fù)爆發(fā),,尤其孢子很難殺滅,。
支原體:支原體污染后,因?yàn)樗鼈儾粫?huì)使細(xì)胞死亡可以與細(xì)胞長(zhǎng)期共存,培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁,,細(xì)胞無(wú)明顯變化,,外觀上給人以正常感覺(jué),實(shí)則細(xì)胞已經(jīng)受到多方面潛在影響,,如引起細(xì)胞變形,,影響DNA合成,抑制細(xì)胞生長(zhǎng)等,,往往被大多數(shù)實(shí)驗(yàn)者忽視,。
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