二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個類似細胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境如穩(wěn)定的溫度（37°C）,、穩(wěn)定的CO2水平（5%）、恒定的酸堿度（pH值：7.2-7.4）,、較高的相對濕度（95%）,，來對細胞/組織進行體外培養(yǎng)的一種裝置。廣泛應(yīng)用于細胞,、組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng),，常見于細胞動力學(xué)研究、哺乳動物細胞分泌物的收集,、各種物理,、化學(xué)因素的致癌或毒理效應(yīng)、抗原的研究和生產(chǎn),、培養(yǎng)雜交瘤細胞生產(chǎn)抗體,、體外授精（IVF）、干細胞,、組織工程,、藥物篩選等研究領(lǐng)域。
在生物活體內(nèi),，生物體有自身的免疫系統(tǒng)保護細胞或組織,，但是在體外培養(yǎng)時，沒有任何保護自己的免疫屏障,。對于二氧化碳培養(yǎng)箱的基本參數(shù)溫度,、CO2和濕度，大多數(shù)培養(yǎng)箱都能滿足研究實驗的需要,。然而,，針對培養(yǎng)過程中面臨的各種污染源，各品牌二氧培養(yǎng)箱的控制方式和效果不盡相同,，因此細胞體外培養(yǎng)中zui大的威脅實際上是污染問題,。
二氧化碳培養(yǎng)箱中的主要污染源：細菌,、真菌（霉菌和酵母菌）、病毒,、支原體,、非同種細胞。
對于細胞來說,，非常理想的培養(yǎng)環(huán)境同樣也適合這些污染物的生存,，培養(yǎng)箱本身是不會辨別的，而細胞培養(yǎng)中大部分時間里細胞都是位于培養(yǎng)箱內(nèi),，因此箱體內(nèi)能否抑菌或滅菌非常關(guān)鍵,！
細菌：細菌污染后，培養(yǎng)基1-2天就會變色,，對細胞生長影響明顯,，應(yīng)迅速將污染細胞與其它細胞系隔離，滅菌后丟棄,，還要用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺,。病毒：由于病毒寄生生存，爆發(fā)后盡快和正常細胞隔離,，丟棄處理,，相對來說容易處理,，對操作者威脅較大,；盡管病毒污染的細胞不影響原代培養(yǎng)，但生產(chǎn)疫苗是不安全的,。因此,，潛在病毒是細胞大量生產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題,。真菌（霉菌和酵母菌）：真菌生長的比較慢,，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了,；目前沒有好的抑制方法,，包括現(xiàn)在常用的兩性霉素，一旦污染容易反復(fù)爆發(fā),，尤其孢子很難殺滅,。
支原體：支原體污染后，因為它們不會使細胞死亡可以與細胞長期共存,，培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁,，細胞無明顯變化，外觀上給人以正常感覺,，實則細胞已經(jīng)受到多方面潛在影響,，如引起細胞變形,，影響DNA合成，抑制細胞生長等,，往往被大多數(shù)實驗者忽視,。
非同種細胞：即細胞交叉污染，由于細胞培養(yǎng)操作時各細胞株所需的器材和溶液沒有嚴格分開,，往往會使一種細胞被另一種細胞污染,。目前，世界上已有幾十種細胞都被HeLa細胞所污染,，致使許多實驗宣告無效,。
因此，以上污染一旦發(fā)生,，細胞zui后基本只能丟棄,，實驗無法挽救，對于許多取樣困難的實驗損失無法估量,！
目前,，二氧化碳培養(yǎng)箱的滅菌技術(shù)主要有干熱、濕熱,、紫外燈照射,、消毒劑擦拭等。高溫干熱空氣滅菌是目前*的zui有效的滅菌技術(shù),，能*消滅所有微生物污染源（包括耐高溫的芽孢桿菌）,；濕熱滅菌通常用于高壓蒸汽滅菌中，比較少用在CO2培養(yǎng)箱上,，濕熱滅菌在常壓下又叫煮沸法,，煮沸的水溫一般至少需為100℃，細菌繁殖體煮沸5分鐘被殺死,，但芽胞常需煮沸2小時以上才可被殺死,；紫外燈照射法的有效性受很多因素影響，如遮擋,、時間,、強度、照射距離,，濕度等,，滅菌效果很難保證；消毒劑擦拭法是對表面滅菌的方法,，適合于平整的表面如實驗臺面,，而箱體內(nèi)部設(shè)計的死角、各種器件因無法擦拭等因素導(dǎo)致滅菌效果也很有限,，而且含氯,、碘的消毒劑對于不銹鋼有腐蝕作用,，不能對不銹鋼箱體進行擦拭滅菌。
以上就是本篇的全部內(nèi)容了,，如需了解更多技術(shù)知識,，歡迎聯(lián)系上海喆圖科學(xué)儀器有限公司。
20
立即詢價
您提交后,，專屬客服將第一時間為您服務(wù)