二氧化碳培養(yǎng)箱用途廣泛,,主要用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞、組織和某些特殊微生物,,為它們提供一個(gè)良好的體外培養(yǎng)環(huán)境,,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)、微生物學(xué)實(shí)驗(yàn),、組織學(xué)實(shí)驗(yàn)以及分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn),。因此,二氧化碳培養(yǎng)箱的清潔維護(hù)尤為重要,。下面喆圖小編就來(lái)給大家分享一下如何對(duì)二氧化碳的污染進(jìn)行防控吧,。
二氧化碳培養(yǎng)箱的常見(jiàn)污染
進(jìn)入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)環(huán)境中,對(duì)細(xì)胞生存有害的成分和造成細(xì)胞不純的異物都應(yīng)視為污染,。不同的污染物對(duì)細(xì)胞的影響也有差別,,有的影響是長(zhǎng)期、緩慢和潛在的,而有的則能在很短的時(shí)間內(nèi)抑制細(xì)胞生長(zhǎng)或殺死細(xì)胞,。根據(jù)污染源不同主要可以分為:生物性污染,、化學(xué)性污染、物理性污染和氣溶膠污染,。
1,、生物性污染:
這是最常見(jiàn)也是危害最大的污染。如細(xì)菌,、病毒,、真菌,支原體等,。這些污染源有可能是人為帶入,,或是細(xì)胞在放入二氧化碳培養(yǎng)箱前已經(jīng)受污染,再或者是箱體本身沒(méi)有消毒干凈,。體外培養(yǎng)的細(xì)胞自身沒(méi)有抵抗污染的能力,,而培養(yǎng)基中所加抗生素的抗微生物污染的能力也是有限的,因而細(xì)胞微生物污染一旦發(fā)生往往是無(wú)法挽救的,。
2,、化學(xué)性污染:
二氧化碳培養(yǎng)箱中許多化學(xué)物質(zhì)都可以引起細(xì)胞污染。如細(xì)胞培養(yǎng)容器清洗過(guò)程中殘留的洗滌劑,、加濕器中未純化的水,、人為帶入的液體或氣體都可能成為化學(xué)性污染的來(lái)源。不同化學(xué)物質(zhì)對(duì)細(xì)胞污染是不一樣的,,有的可能促進(jìn)或抑制細(xì)胞生長(zhǎng),,有的甚至殺死細(xì)胞。
3,、物理性污染:
培養(yǎng)環(huán)境中的物理因素,,如溫度、放射線,、振動(dòng),、輻射(紫外線或熒光)會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生影響。物理性污染常常被人們所忽視,,其主要是在代謝水平或分子水平上,,影響細(xì)胞正常的生理過(guò)程。
4,、氣溶膠污染:
氣溶膠是液體或固體微粒均勻地懸浮在氣體介質(zhì)中的分散體系,,當(dāng)微粒是微生物時(shí),就是微生物氣溶膠,,如果這種微生物是病原性的,,就是病原微生物氣溶膠,。細(xì)菌、病毒等病原體通過(guò)氣溶膠可在人與人,、人與環(huán)境之間傳播,。
二氧化碳培養(yǎng)箱污染防控措施
1、二氧化碳培養(yǎng)箱的選擇:
二氧化碳培養(yǎng)箱的制造商們?cè)O(shè)計(jì)了多種不同的裝置去減少和防止污染的發(fā)生,,其主要是防污染設(shè)計(jì)和消毒滅菌系統(tǒng)的改進(jìn),,以達(dá)到消毒滅菌的目的。如帶有紫外消毒功能的二氧化碳培養(yǎng)箱,、帶HEPA過(guò)濾器凈化空氣的二氧化碳培養(yǎng)箱,以及帶高溫滅菌的二氧化碳培養(yǎng)箱等,,后者又分為高溫干熱和高溫濕熱兩類,。這些裝置的滅菌能力各有千秋,紫外燈消毒范圍有限,,距離燈越遠(yuǎn),,或者被遮擋,消毒能力越差,。
HEPA過(guò)濾器的過(guò)濾膜孔徑有限,,無(wú)法去除病毒和一些微小細(xì)菌,并且容易損耗,,也有其局限性,。相比而言,高溫滅菌則是比較有效的方法,。而高溫干熱和高溫濕熱也有所不同,,不同方法的滅菌效率與溫度的高低也有著直接的關(guān)系。
2,、培養(yǎng)工作人員習(xí)慣:
人為因素和態(tài)度可以對(duì)環(huán)境,、人和物起到一個(gè)正面或負(fù)面的影響。以安全為目的,,實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的工作人員應(yīng)明白自身的態(tài)度和人為因素對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境的重要性,。因此,對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員進(jìn)行專業(yè)培訓(xùn)對(duì)防污染有著重要作用,。
3,、重視管理:
細(xì)胞室內(nèi)的二氧化碳培養(yǎng)箱應(yīng)由專人負(fù)責(zé)管理,定期對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行校正,,至少每年一次,。各項(xiàng)數(shù)值一旦固定后,不要隨意調(diào)節(jié),,以免影響箱內(nèi)溫度,、濕度,、CO2濃度的波動(dòng),降低機(jī)器的靈敏度,,同時(shí)還會(huì)影響二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)的細(xì)胞生產(chǎn)狀態(tài),。
使用前,對(duì)二氧化碳培養(yǎng)箱的各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行系統(tǒng)校正,,并且對(duì)箱體和內(nèi)部進(jìn)行消毒處理,,等各項(xiàng)數(shù)值穩(wěn)定一段時(shí)間后方可使用。一旦出現(xiàn)緊急問(wèn)題,,應(yīng)及時(shí)上報(bào),,應(yīng)由專業(yè)的人員進(jìn)行操作,馬上采取應(yīng)對(duì)措施,,以免造成不必要的損失,。
4、規(guī)范操作:
二氧化碳培養(yǎng)箱的使用雖然很簡(jiǎn)單,,但同樣需要規(guī)范操作,。進(jìn)細(xì)胞室必須穿著實(shí)驗(yàn)服,換上拖鞋或者穿一次性的鞋套,。實(shí)驗(yàn)操作時(shí)必須帶一次性手套,,特別是打開(kāi)二氧化碳培養(yǎng)箱前,必須先用75%的酒精噴壺噴洗雙手再開(kāi)二氧化碳培養(yǎng)箱,,再取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板,。顯微鏡下查看細(xì)胞培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板后,再放回二氧化碳培養(yǎng)箱時(shí),,同樣也要噴酒精消毒,。
二氧化碳培養(yǎng)箱的兩個(gè)門開(kāi)關(guān)取(放)物要迅速,不可長(zhǎng)時(shí)間開(kāi)著,,否則會(huì)影響CO2的濃度,、溫度和濕度,以及造成污染,。尤其是不要忘了關(guān)好里層的玻璃門,。切記開(kāi)門時(shí)不要對(duì)著二氧化碳培養(yǎng)箱說(shuō)話,大口呼吸或打噴嚏,。
5,、加強(qiáng)防護(hù):
如果實(shí)驗(yàn)人員生病而攜帶病菌,應(yīng)做好防護(hù)措施再進(jìn)細(xì)胞室,,病情嚴(yán)重的則不宜進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。女性同志實(shí)驗(yàn)時(shí)頭發(fā)應(yīng)梳起,防止皮屑污染及連帶事件的發(fā)生,。如果實(shí)驗(yàn)室條件允許,,可以每人佩戴實(shí)驗(yàn)帽,、手套等防護(hù)工具,以防污染二氧化碳培養(yǎng)箱及對(duì)實(shí)驗(yàn)人員的自身的防護(hù),。
6,、注重保養(yǎng):
二氧化碳培養(yǎng)箱置于細(xì)胞室中,室內(nèi)需保持干燥,,環(huán)境溫度不能超過(guò)30℃(建議保持在18℃-30℃),。二氧化碳培養(yǎng)箱放置在遠(yuǎn)離門窗、供暖設(shè)備和空調(diào)導(dǎo)管的地方,,不能被陽(yáng)光直接照射,。二氧化碳培養(yǎng)箱的放置臺(tái)面必須水平避震且非易燃材質(zhì),不能靠在墻壁或類似的建筑物上,,其后部接電處和墻壁至少保留30cm的空間,。一旦放好不宜再移動(dòng)。
7,、校正處理:
二氧化碳培養(yǎng)箱在放好后,再對(duì)箱體和內(nèi)部進(jìn)行消毒處理,,并且對(duì)各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行系統(tǒng)校正,,等各項(xiàng)數(shù)值穩(wěn)定一段時(shí)間后方可使用。因CO2氣體對(duì)于健康是有害的,,因此細(xì)胞室需安裝足夠的通風(fēng)裝置,。空氣中的粉塵氣溶膠易造成二氧化碳培養(yǎng)箱的污染,,需要一個(gè)流通的空氣環(huán)境,。將二氧化碳培養(yǎng)箱的管理任務(wù)分派給有經(jīng)驗(yàn)的檢查人員是十分重要的。如長(zhǎng)期不使用二氧化碳時(shí),,應(yīng)將CO2開(kāi)關(guān)關(guān)閉,,防止CO2調(diào)節(jié)器失靈,避免給實(shí)驗(yàn)室?guī)?lái)安全性事件,。如需了解更多二氧化碳培養(yǎng)箱相關(guān)的知識(shí),,歡迎聯(lián)系上海喆圖科學(xué)儀器有限公司。
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