一,、實驗?zāi)康?/p>
清楚培養(yǎng)基的配制原理,,了解配制培養(yǎng)基的常用方法和步驟,認(rèn)識常見滅菌,、清毒基本原理及方法,掌握過濾除菌,、高壓蒸汽滅菌及干熱滅菌的操作方法,。
二、實驗原理
培養(yǎng)基是人工按比例配制的供微生物生長繁殖和合成代謝產(chǎn)物所需要的營養(yǎng)物質(zhì)的混合物,。培養(yǎng)基的原材料可分為水,、無機鹽、氮源,、碳源和生長因素,。根據(jù)微生物的種類和實驗?zāi)康牟煌囵B(yǎng)基也有多種不一樣的種類和配制方法,。蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用廣泛和普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基,,有時又稱為普通培養(yǎng)基。由于這種培養(yǎng)基中含有一般細(xì)胞生長繁殖所需要的基本的營養(yǎng)物質(zhì),,所以可供微生物生長繁殖之用,。干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過升溫使蛋白質(zhì)變性從而達(dá)到殺死微生物的效果,。
三,、器材與試劑
1.器材 :試管、玻璃棒,、培養(yǎng)基,、牛角匙、分裝器,、三角瓶,、燒杯、量筒,、天平,、高壓蒸汽滅菌鍋、pH度紙,、鑷子,、麻繩、棉花、牛皮紙,、記號筆,、紗布、培養(yǎng)皿,、干熱滅菌箱,、注射器、吸管,、微孔濾膜過濾器等,。
2.試劑 蛋白胨、NaCl,、瓊脂
四,、實驗步驟
1.稱量→溶化→調(diào)pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查
2.干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物
3.高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查
4.過濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌
五、關(guān)鍵步驟及注意事項
1.要嚴(yán)格按配方配制,。
2.調(diào)pH不要過頭,。
3.干熱滅菌要注意物品不要堆放過緊,注意溫度的時間控制,,60ºC以下放物,、取物。
4.高壓滅菌要注意物品不要過多,,加熱后先排除冷空氣,,降壓回零后取物。
5.過濾除菌要注意各部件滅菌,,壓濾時,,壓力要適當(dāng),不可太猛太快,,濾膜要注意清洗保存,。
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