根據(jù)臨床初步診斷及待檢細菌的種類,可選用不同環(huán)境條件進行培養(yǎng),。常用的有需氧培養(yǎng)法,、二氧化碳培養(yǎng)法和厭氧培養(yǎng)法。為了提高檢驗的正確率,,同一標本常同時采用兩種或三種不同的培養(yǎng)法,。
需氧培養(yǎng)法 本法是臨床細菌室常用的培養(yǎng)方法,適于一般需氧和兼性厭氧菌的培養(yǎng),。將已接種好的平板,、斜面和液體培養(yǎng)基等,置于35℃溫箱中孵育18~24h,,一般細菌可于培養(yǎng)基上生長,但有些難以生長的細菌需培養(yǎng)更長的時間才能生長,。另外,,有的細菌適生長溫度是28℃~30℃,如鼠疫耶爾森菌,,甚至在4℃也能生長,,如李斯特菌。
二氧化碳培養(yǎng)法 有些細菌初次分離培養(yǎng)時須置5%~l0%C02環(huán)境才能生長良好,,如腦膜炎奈瑟菌,、淋病奈瑟菌,牛布魯菌等,。常以下列方法供給C02,。
1.二氧化碳培養(yǎng)箱:是一臺特制的培養(yǎng)箱,,既能調(diào)節(jié)C02的含量,又能調(diào)節(jié)所需的溫度,。C02從鋼瓶通過培養(yǎng)箱的C02,,運送管進入培養(yǎng)箱內(nèi),調(diào)節(jié)好所需C02,,濃度自動控制器后,,將接種好的培養(yǎng)基直接放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)即可。此法適于大型實驗室應(yīng)用,。
2.燭缸法:將已接種好的培養(yǎng)基置干燥器內(nèi),,并放入點燃的蠟燭。干燥器蓋的邊緣涂上凡士林,,蓋上蓋子,,燭光經(jīng)幾分鐘后自行熄滅,此時干燥器內(nèi)C02含量約占5%~l0%,,然后將干燥器放入35℃溫箱內(nèi)培養(yǎng),。培養(yǎng)時間一般為18~24h,少數(shù)菌種需培養(yǎng)3~7天或更長,。
3.化學法:按每升容積加入碳酸氫鈉0.49和濃鹽酸0.35ml的比例,,分別置于容器內(nèi)。將容器連同接種好的培養(yǎng)基都放人干燥器內(nèi),,蓋緊干燥器的蓋子,,傾斜容器使?jié)恹}酸與碳酸氫鈉接觸生成C02。
厭氧培養(yǎng)法 適用于專性厭氧菌和兼性厭氧菌的培養(yǎng),。常用的厭氧培養(yǎng)法有:
①皰肉培養(yǎng)基法,;②焦性沒食子酸法;③厭氧罐法,;④氣袋法,;⑤厭氧培養(yǎng)箱法。
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