使用恒溫培養(yǎng)箱進(jìn)行乳糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)
乳糖發(fā)酵( Lactose Fermentation Experiment ) 是常用的鑒別微生物的生化反應(yīng),,在腸道細(xì)菌的鑒定上尤為重要,,是初步鑒定腸道致病菌與非致病菌常用的試驗(yàn),。應(yīng)用于食品,環(huán)境行業(yè)比較多.下面小編給大家介紹一下乳糖檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)方法,,供大家參考
一,、乳糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)
1、取10ml水樣接種到10ml雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中,,取1ml水樣接種到10ml單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中,,另取1ml水樣注入到9ml滅菌生理鹽水中,混勻后吸取1ml(即0.1ml水樣)注入到10ml單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中,,每一稀釋度接種5管,。對(duì)已處理過的出廠自來水,需經(jīng)常檢驗(yàn)或每天檢驗(yàn)一次的,,可直接種5份10ml水樣雙料培養(yǎng)基,,每份接種10ml水樣。
2,、檢驗(yàn)水源水時(shí),,如污染較嚴(yán)重,應(yīng)加大稀釋度,,可接種1,,0.1,0.01ml甚至0.1,,0.01,,0.001ml,每個(gè)稀釋度接種5管,,每個(gè)水樣共15管,。接種1ml以下水樣時(shí)必須作10倍遞增稀釋后,取1ml接種,,每遞增稀釋一次,,換用1支1ml滅菌刻度吸管。
3,、將接種管置36±10℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),,培養(yǎng)24h±2h,如所有乳糖蛋白胨培養(yǎng)管都不產(chǎn)氣產(chǎn)酸,,則可報(bào)告為總大腸菌群陰性,,如有產(chǎn)酸產(chǎn)氣者,則按下列步驟進(jìn)行,。
二,、分離培養(yǎng):經(jīng)培養(yǎng)24h后,將產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管,,分別接種于伊紅美藍(lán)平板上,,36±10℃慍溫培養(yǎng)8h-24h,,觀察形態(tài),挑取數(shù)個(gè)可疑菌落進(jìn)行涂片,、革蘭氏染色,、鏡檢。
三,、證實(shí)試驗(yàn):挑取可疑管接種乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中,,置于36±10℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h±2h,有產(chǎn)酸產(chǎn)氣者,,即證實(shí)有總大腸菌群存在,。
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