首先喆圖小編來(lái)給大家講講荸薺,, 又名馬蹄、水栗,、芍,、鳧茈、烏芋,、菩薺,、地梨,是莎草科荸薺屬一種屬于多年生淺水性草本植物,。我國(guó)荸薺的產(chǎn)量占世界的95%以上,,長(zhǎng)江流域以南各省均有大量栽培,是一種重要的水生植物,。
荸薺皮作為荸薺加工及食用后的下腳料,,占鮮荸薺質(zhì)量的25%左右,資源量很大,,然而絕大多數(shù)以廢物的形式丟棄或作為農(nóng)戶(hù)肥料,,造成環(huán)境污染和資源的極大浪費(fèi)。黃酮是具有酚羥基的一類(lèi)還原性化合物,,在復(fù)雜反應(yīng)體系中,,由于其自身被氧化而具有抗氧化作用。凡符合高分子化合物概念的碳水化合物及其衍生物均稱(chēng)為多糖,。
而在荸薺肉和荸薺皮中含有豐富的多糖類(lèi)化合物與黃酮類(lèi)化合物,。目前,對(duì)于提取植物中黃酮類(lèi)化合物的方法有好多種,,接下來(lái)為了有效開(kāi)發(fā)和利用荸薺原料,、減輕環(huán)保壓力,提供一種簡(jiǎn)單,、有效的方法,,實(shí)驗(yàn)所需材料如下:
1、購(gòu)買(mǎi)新鮮荸薺,,削皮把皮和肉分裝處理好備用,。
2、荸薺皮:收集新鮮荸薺, 剔除雜質(zhì)及腐跡, 于鼓風(fēng)干燥箱中80 ℃烘6 h , 再用粉碎機(jī)粉碎備用,。
3,、荸薺肉:收集新鮮荸薺肉切碎,于鼓風(fēng)干燥箱中烘干,,再用粉碎機(jī)粉碎備用,。
所需試劑與儀器:
蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品,、無(wú)水乙醇、無(wú)水甲醇,、苯酚,、葡萄糖、濃硫酸,、丙酮、亞硝酸鈉,、硝酸鋁,、氫氧化鈉、水楊酸,、過(guò)氧化氫,、 三羥甲基氨基甲烷、鹽酸,、鄰苯三酚(焦性沒(méi)食子酸),、1,1 - 二苯基-2- 苦基苯肼。蒸餾水,、去離子水,。 粉碎機(jī)、離心機(jī),、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器,、電熱恒溫水浴鍋、鼓風(fēng)干燥箱,、25ml比色管,、50 mL 容量瓶、100ml容量瓶,、移液管,、電子天平、超聲清洗器,、分光光度計(jì),、10ml試管。
肉中多糖提?。?超聲輔助提取法:蒸餾水(料液比1:25),,預(yù)熱10min,超聲20min,,超聲功率80W,,提取溫度60℃,離心并收集長(zhǎng)層清液,,加入95%的乙醇使乙醇含量達(dá)到 70%以上然后靜置沉淀,。離心收集沉淀,,用無(wú)水甲醇,以除去水分和雜質(zhì),,然后晾干備用,。
皮中黃酮提取
乙醇提取法:乙醇60% 超聲提取50min。取荸薺皮20g,,料液比1:12 提取溫度60℃離心后收集上層清液,,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干后,加水溶解,,溶解*后轉(zhuǎn)移至容量瓶中,。
實(shí)驗(yàn)方法:溶液含量測(cè)定及溶液配制
樣品溶液含量測(cè)定:分別采用蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法、苯酚-硫酸葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法測(cè)定樣品溶液里面黃酮與多糖的含量,。
黃酮溶液:把黃酮溶解液配成25ml一定濃度梯度,。(0.1,0.2,0.4,0.6,0.8 mg/ml)
多糖溶液:配成與黃酮等濃度梯度的多糖溶液。(0.1,0.2,0.4,0.6,0.8 mg/ml)
實(shí)驗(yàn)操作:
1,、 取5支試管加入不同濃度梯度溶液1 mL,,再加入3 mL 濃度為0.04 mg/mL的DPPH 溶液,混合均勻,,于室溫下避光放置40min,,在波長(zhǎng)517 nm 處測(cè)其吸光度為A1;另各取1 mL 2.4.1溶液于試管中,,分別加入無(wú)水乙醇3mL,,于室溫下避光放置40 min,在波長(zhǎng)517 nm 處測(cè)其吸光度為A2,;以3 mL 0.04 mg/mL DPPH 和1mL 無(wú)水乙醇反應(yīng)做為參比,,其吸光度記為A0
2、 清除羥基自由基能力測(cè)定 Fenton反應(yīng)產(chǎn)生羥基自由基,,H2O2/Fe2+體系通過(guò)Fenton反應(yīng)產(chǎn)生羥基自由基 化學(xué)反應(yīng)式如:H2O2+Fe2+ →·OH+OH+ Fe3+ ·OH氧化水楊酸會(huì)產(chǎn)生有色物質(zhì),,該物質(zhì)在510nm處有強(qiáng)吸收峰,若體系 9 里面加入清除·OH的活性物質(zhì),,則就減少有色物質(zhì)生成,,吸光度值就會(huì)降低,吸光度值越低清除·OH效果就越好,。
實(shí)驗(yàn)操作:
1,、取6支25ml比色管,并依次編號(hào),,每支比色管各加入9mmol/LFeSO41ml, 9mmol/L水楊酸-乙醇溶液2ml,,按試管編號(hào)各加入不同濃度的標(biāo)題2.4.1溶液2ml,后加入8.8mmol/L H2O22ml啟動(dòng)反應(yīng),用去離子水定容至刻度,,于室溫下反應(yīng)1h,。以去離子水代替溶液作空白對(duì)照,在510nm處測(cè)定樣品的吸光度,,記錄數(shù)據(jù),。
清除超氧陰離子能力測(cè)定 對(duì)超氧陰離子的清除作用,鄰苯三酚自氧化反應(yīng)方法 :
實(shí)驗(yàn)操作: 取8支洗凈干燥的25 mL比色管依次按照步驟加入
步:編號(hào)后依次加入5 mL 25℃預(yù)熱20min的pH= 8.2濃度為0.05mol/L 的Tris-HCL緩沖液,;
第二步:在3-8號(hào)加入5 mL標(biāo)題2.4.1溶液,;
第三步:在2-8號(hào)加入2.5mL 在25℃下預(yù)熱20 min濃度為0.5 mmol·L-1 的鄰苯三酚溶液;
第四步:然后用去離子水定容至刻度,。
第五步:在波長(zhǎng)為325 nm下每隔30 s測(cè)1次吸光值,。以1 號(hào)比色管作為空白。記錄數(shù)據(jù)
以上內(nèi)容為荸薺在食品和藥品領(lǐng)域的有效應(yīng)用提供理論參考,,如需了解詳情請(qǐng)聯(lián)系喆圖客服!
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