細(xì)胞培養(yǎng)時,,使用的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)通常采用兩種方式控制箱體內(nèi)濕度,。一是采用被動控濕法,,即通常的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)均放置一個3L的水盤,內(nèi)盛3L無菌純水,,依靠水的自然蒸發(fā),,使箱體內(nèi)濕度達(dá)到95%。二是一些的CO2培養(yǎng)箱,,采用主動加濕系統(tǒng)(蒸汽發(fā)生器,,加熱水盤,噴霧器等),,可以控制箱體內(nèi)的濕度,。
然而在這種高濕度條件下,放置在箱體內(nèi)部的水盤中的純凈水,,很容易造成微生物的滋生,,產(chǎn)生污染,導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)*失敗,。
目前,,控制水盤內(nèi)污染的方法有如下幾種:
1、 定期(至少每兩周一次),,更換水盤內(nèi)的無菌蒸餾水或無菌去離子水,。
2、 在水盤內(nèi)添加適量硫酸銅,,配制方法:20g無水硫酸銅+5ml濃硫酸+1L滅菌純水,。
3、 夏季氣溫高時,,水盤里加0.02%的疊氮鈉可以有效的預(yù)防真菌污染,。
4、 水盤內(nèi)添加適量抗生素,。
5,、 定期為培養(yǎng)箱(含水盤)進(jìn)行一次高溫滅菌,。
6、 使用的水盤污染控制試劑,,如市面上有些CO2培養(yǎng)箱廠家提供水盤污染控制的銀離子消毒盒,,說明書上描述能有效殺滅600中微生物,能持續(xù)使用6個月,,但此類污染控制試劑較常規(guī)方法,,存在價格較昂貴缺點(diǎn)。
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