細胞培養(yǎng)時,,使用的CO2培養(yǎng)箱內通常采用兩種方式控制箱體內濕度。一是采用被動控濕法,,即通常的CO2培養(yǎng)箱內均放置一個3L的水盤,,內盛3L無菌純水,依靠水的自然蒸發(fā),,使箱體內濕度達到95%,。二是一些的CO2培養(yǎng)箱,,采用主動加濕系統(tǒng)(蒸汽發(fā)生器,加熱水盤,,噴霧器等),,可以控制箱體內的濕度。
然而在這種高濕度條件下,,放置在箱體內部的水盤中的純凈水,,很容易造成微生物的滋生,產(chǎn)生污染,,導致細胞培養(yǎng)*失敗,。
目前,控制水盤內污染的方法有如下幾種:
1,、 定期(至少每兩周一次),,更換水盤內的無菌蒸餾水或無菌去離子水。
2,、 在水盤內添加適量硫酸銅,,配制方法:20g無水硫酸銅+5ml濃硫酸+1L滅菌純水。
3,、 夏季氣溫高時,,水盤里加0.02%的疊氮鈉可以有效的預防真菌污染。
4,、 水盤內添加適量抗生素,。
5、 定期為培養(yǎng)箱(含水盤)進行一次高溫滅菌,。
6,、 使用的水盤污染控制試劑,如市面上有些CO2培養(yǎng)箱廠家提供水盤污染控制的銀離子消毒盒,,說明書上描述能有效殺滅600中微生物,,能持續(xù)使用6個月,但此類污染控制試劑較常規(guī)方法,,存在價格較昂貴缺點,。
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