標(biāo)簽： 甲基化 特異性 PCR
DNA甲基化是一種表觀遺傳修飾，它是由DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（DNA methyl-transferase, Dnmt）催化S-腺苷甲硫氨酸作為甲基供體,，將胞嘧啶轉(zhuǎn)變?yōu)?-甲基胞嘧啶（mC）的一種反應(yīng),，在真核生物DNA中，5-甲基胞嘧啶是唯yi存在的化學(xué)性修飾堿基,。
| 實(shí)驗(yàn)方法原理 | MSP是一種簡(jiǎn)便,、特異的、敏感的檢測(cè)單基因甲基化的方式,。其基本原理是用亞硫酸氫鈉處理基因 組DNA,，未甲基化的胞嘧啶變成尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不變,，然后用3對(duì)特異性的引物對(duì)所測(cè)基因的同一核苷酸序列進(jìn)行擴(kuò)增,。擴(kuò)增產(chǎn)物用DNA瓊脂糖凝膠電泳,，凝膠掃描觀察分析結(jié)果,。 |
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| 實(shí)驗(yàn)材料 | DNA |
| 試劑、試劑盒 | 亞硫酸氫鈉,、氫醌,、石蠟油、乙醇 |
| 儀器,、耗材 | 水浴鍋,、PCR儀 |
| 實(shí)驗(yàn)步驟 | 1. 在50 μl 體系中，DNA（2~5 μg）經(jīng)NaOH（終濃度值0.2 mol/L）在37℃變性10 Min,。
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