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Endoglin ELISA 試劑盒
Endoglin ELISA 試劑盒專為體外定量檢測生物樣本中的 Endoglin 含量而設(shè)計(jì)。Endoglin,，也被稱為 CD105,，是一種主要表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的跨膜糖蛋白。它在血管生成,、細(xì)胞增殖,、遷移以及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等過程中發(fā)揮著極為關(guān)鍵的作用。
在正常生理狀態(tài)下,，Endoglin 參與調(diào)控血管的發(fā)育與穩(wěn)態(tài)維持,，保障組織器官的正常血液供應(yīng)。而在多種病理情況下,，其表達(dá)水平會發(fā)生顯著變化,。在腫瘤領(lǐng)域，腫瘤組織的快速生長需要大量新生血管來提供養(yǎng)分,，此時(shí) Endoglin 在腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞上的表達(dá)會大幅上調(diào)。通過檢測 Endoglin 含量,，能夠輔助腫瘤的早期診斷,，評估腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移潛能，還能用于監(jiān)測腫瘤/治療過程中血管生成抑制劑的療效,。在心血管疾病如動脈粥樣硬化中,，血管內(nèi)皮功能受損，Endoglin 的表達(dá)異常也與疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),，檢測它有助于深入了解病情并制定針對性治療方案,。此外，在一些遺傳性血管性疾病中,，Endoglin 基因的突變會導(dǎo)致其功能異常,，引發(fā)相應(yīng)的臨床癥狀，對 Endoglin 的檢測在這些疾病的診斷和遺傳咨詢方面具有重要意義,。
該試劑盒運(yùn)用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）技術(shù),。試劑盒的核心組件是預(yù)包被有抗人 Endoglin 單克隆抗體的微孔板。當(dāng)加入血清,、血漿,、細(xì)胞培養(yǎng)上清等待測樣本后，樣本中的 Endoglin 會特異性地與包被抗體結(jié)合,。完成結(jié)合反應(yīng)后,，經(jīng)過精心設(shè)計(jì)的洗板步驟,，能夠有效去除未結(jié)合的雜質(zhì)，為后續(xù)檢測營造純凈環(huán)境,。隨后,，加入酶標(biāo)抗人 Endoglin 抗體，它會與已結(jié)合在包被抗體上的 Endoglin 進(jìn)一步結(jié)合,，形成穩(wěn)定的抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體復(fù)合物,。再次進(jìn)行洗板操作，徹di清除未結(jié)合的酶標(biāo)抗體,，接著加入底物 A 和底物 B 啟動顯色反應(yīng),。在辣根過氧化物酶（HRP）的催化作用下，底物發(fā)生反應(yīng),，顏色逐漸顯現(xiàn),，且顏色的深淺與樣本中 Endoglin 的含量呈正相關(guān)。使用者借助酶標(biāo)儀在特定波長下測定吸光度（OD 值）,，依據(jù)預(yù)先繪制好的標(biāo)準(zhǔn)曲線,，即可精準(zhǔn)計(jì)算出樣本中 Endoglin 的濃度。
試劑盒組成科學(xué)合理,，包含預(yù)包被微孔板,、標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)抗體,、底物 A,、底物 B、終止液,、濃縮洗滌液以及樣本xi釋液等,。從原材料的嚴(yán)格篩選采購，到生產(chǎn)過程中的精細(xì)制作,，再到成品的多輪嚴(yán)格檢驗(yàn),，每一個(gè)環(huán)節(jié)都層層把關(guān)，確保為使用者提供質(zhì)量穩(wěn)定,、結(jié)果準(zhǔn)確的試劑盒,。
在操作流程方面，首先要根據(jù)樣本類型進(jìn)行妥善處理,。血清樣本需自然凝固后離心取上清,；血漿樣本則需使用合適的抗凝劑處理后離心；細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本若有沉淀需先離心去除,。接下來,，合理設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，分別準(zhǔn)確加入標(biāo)準(zhǔn)品和經(jīng)過稀釋的樣本,。將微孔板放入 37℃恒溫箱中溫育,，使抗原抗體充分反應(yīng),。溫育結(jié)束后，進(jìn)行洗板操作,，這一步至關(guān)重要,，務(wù)必保證洗滌充分，防止殘留物質(zhì)干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。加入酶標(biāo)抗體后再次溫育,，由于底物對光敏感，在加入底物進(jìn)行顯色時(shí),，必須在避光條件下操作,。顯色達(dá)到規(guī)定時(shí)間后，加入終止液終止反應(yīng),，最后使用酶標(biāo)儀讀取 OD 值,。值得注意的是，不同批次的試劑盒組分嚴(yán)禁混用,，整個(gè)操作過程必須嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行,，以此保障檢測結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。